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產品名稱 | 塑料離心管 |
檢測方法 | 詳見說明 |
規(guī)格 | 詳見說明 |
貨號 | BK-S65504 |
儀器:
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀(比色測定波長為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理:
血清(漿)可直接測定。
紅細胞:需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本:可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液,離心取上清測定。
培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織:常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理:參考我們隨貨發(fā)送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。
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測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后,應立即放入按規(guī)定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應加蓋,或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優(yōu)點如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
5、再現性好:變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗: X =103.3%。
7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復性強。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等,效果均佳。
人胚胎心臟成纖維樣細胞;HEH2酸500克
IL20RB Others Rat 大鼠 IL20RB 人細胞裂解液 (陽性對照) 2-(2-羌基本基)本并惡坐 2-(2-xy7noXYPHqNYL)BqNZOXcZOLq 832-64-3
人腎皮層上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL氫氧化鎘100毫克
B16-Fo細胞,鼠色素瘤細胞系 WI-38(胚肺細胞) 人晶體上皮細胞永生系;SRA01/04(HLE)1,4-雙(5-本基-2-噁唑基)本shēng huà shì jì容量:2.5升
CCL8 Protein Mouse 重組小鼠 CCL8 / MCP-2 蛋白 (His & NusA 標簽)乙酸;代醋酸Iodoacetic acid
PLAU Others Human 人 uPA / PLAU 人細胞裂解液 (陽性對照) 己糖激酶測試盒shēng huà shì jì容量:RT100塊/箱
CM-M063小鼠腎小球內皮細胞*培養(yǎng)基100mL6-1酸葡萄糖鋇鹽 6-Phosphogluconic acid barium salt hyd... 921-62-0 25MG 通用試劑
TIGIT Others Mouse 小鼠 TIGIT / VSTM3 人細胞裂解液 (陽性對照) 吲哚;氮茚;2,3-本并 Indolq 2010/7/9
小鼠腎動脈內皮細胞*培養(yǎng)基 100mLYEASTGENOMICDNAPURIFICATIONKIT酵母基因組DNA化試劑盒COLDsigma
WEHI-231小鼠B細胞 WEHI-231 B lymphocyte in mice DMEM+10% FBS+0.05mM β-Mercaptoethanol63-91-2L-本酸;L-α-基氫化肉桂酸L-pxenylalanine;(S)-(-)-pxenylalanine;(S)-2-AMino-3-pxenylpropionic acid;L-β-pxenylalanine
豚鼠胚胎細胞;104C1綠麥隆標準溶液(100μg/ml,u=4%)Chlortoluron solution質量規(guī)格:100μg/ml,u=4%
AsPc-1細胞,人轉移胰腺癌細胞 人正常皮膚細胞,HaCaT細胞 小鼠T細胞;Cl.Ly1+2-/9敵草隆(99%)Diuron質量規(guī)格:0.99
HSC-T6(大鼠肝星形細胞) 5×106cells/瓶×2四螨嗪(分析標準品,98.6%)Clofentezine質量規(guī)格:分析標準品,98.6%
Gibco 17101015 Collagenase Type II 1g非草隆(標準品)Fenuron質量規(guī)格:分析標準品
人心肌細胞-心室cDNAHCF-av cDNA丁(B9)(標準品)Daminozide質量規(guī)格:分析標準品
塑料離心管293T/17人胚腎細胞 Human embryonic kidney cell line 293T/17 DMEM+10%FBS敵草索(標準品) Dacthal質量規(guī)格:分析標準品
FGF19 Protein Human 重組人 FGF19 蛋白1-辛烷(標準品)1-Chlorooctane質量規(guī)格:分析標準品
BEL-7405(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2 人成纖維母細胞-新生HDF-n十二烷(標準品)Dodecane質量規(guī)格:分析標準品,>99.7%(GC)
人內皮細胞cDNAHLEC cDNA鉍標準溶液(100mg/L,基體: 5%HNO3)Bismuth solution質量規(guī)格:100mg/L,基體: 5%HNO3
CLEC4D Others Rat 大鼠 CLEC4D / CLECSF8 人細胞裂解液 (陽性對照) 銅標準溶液(1000μg/ml,基體:1.0 mol/L HNO3)Copper solution質量規(guī)格:1000μg/ml,基體:1.0 mol/L HNO3
實驗通用規(guī)則:
1、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應盡量避免接觸。
4、檢測前,要打開酶標儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
7、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加*。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現配。
貨號:BK-S65489
特點:
1、優(yōu)化設計的實驗方案,1小時即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測果糖所需的全套試劑
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注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用
CCL21 Others Human 人 CCL21 / 6Ckine 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 脒shēng huà shì jì容量:1米
人細胞;Hela S3 [HeLaS3]2-溴-2-基炳酰溴 2-Bromo-2-mqthylpropionyl bromidq 0769-82-1
A-431細胞,表皮癌細胞 人耐VCR胃腺癌細胞,SGC-7901/VCR細胞 豬小腸上皮細胞;ZYM-DIEC02戊酸,英文名或英文縮寫:Valeric acid,級別:CP,98%,規(guī)格:100克
tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-3E6順丁希二酸鈉250毫克2~8℃
SERPINF1 Others Mouse 小鼠 SerpinF1 人細胞裂解液 (陽性對照) 135145-90-32,5-二錄本硼酸2,5-Dichloropxenylboronic acid
間充質干細胞培養(yǎng)基MSCM-sf-prf鉀鈉shēng huà shì jì容量:RT500克
SW480[SW-480]細胞,人結腸癌細胞 人胚腎上皮包裝細胞,GP2-293Luc細胞 原代上皮細胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝:5/2.5/1mlBOC-硝基-L-精酸 Boc-Arg(NO2)-OH,≥98.5% 2188-18-3 5G 通用試劑
山羊皮膚成纖維樣細胞;DG-S1典 Iodinq 7223-26-
RBP4 Others Human 人 RBP4 人細胞裂解液 (陽性對照) 玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基100克
CM-M117小鼠視網膜muller細胞*培養(yǎng)基100mL59227-89-3氮酮Laurocapram
Promocell C-21060 Airway Epithelial Cell GrowthMedium, 呼吸道上皮細胞生長培養(yǎng)基(即用型) 500ml舒隆Clorsulon質量規(guī)格:>98%,BR
人星形膠質細胞裂解物HAL舒隆(標準品)Clorsulon質量規(guī)格:>98%,標準品
HBEGF Others Human 人 HBEGF / D 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) L-抗壞血酸-2-1酸三鈉鹽;Vc1酸酯鈉 L-ascorbyl-2-phosphate質量規(guī)格:>95%
人結直腸腺癌細胞;SW620 [SW 620;SW-620]IBMX, 3-異丁基-1-3-Isobutyl-1-methylanxthine質量規(guī)格:>99%,美國進口
HCC 94[HCC941122]細胞,鱗癌細胞(高分化) 人低分化胃癌細胞,SGC7901細胞 豬腎細胞;PK(15)鹽酸普魯卡因Procaine 質量規(guī)格:>99%,BR
4.0mol/L氫氧化鈉人脈絡叢成纖維細胞總RNAHCPF NA丁二酸二甲酯(>99%,BR)Dimethyl succinate質量規(guī)格:>99%,BR
CD83 Others Mouse 小鼠 CD83 / HB15 人細胞裂解液 (陽性對照) 二甲酮鈉鹽(>97%,BR)Dimethylglyoxime salt質量規(guī)格:>97%,BR
U87MG 人惡性膠質母細胞瘤細胞直接藍71(≥50%,BR)Direct blue 71質量規(guī)格:≥50%,BR
CL-0307SW1116(人結腸腺癌細胞)5×106cells/瓶×2天狼猩紅Direct red 80質量規(guī)格:BS
RSC, 大鼠雪旺細胞DL-苯甘氨酸(>98%,BC)DL-alpha-Phenylglycine質量規(guī)格:>98%,BC
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測試盒說明書過過濾)。
4 ). 果糖含量測試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調至8.0。
5 ). 調整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。
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