PCR檢測試劑盒利用高靈敏度和高特異性的探針法進(jìn)行定量,這種簡單的兩步法方案僅需要先使用特異性引物進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,再利用探針進(jìn)行實時定量PCR。
利用針對于金黃色葡萄球菌特異性基因的引物、熒光探針以及其他反應(yīng)所需試劑,加入待檢樣品即可進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)。在發(fā)生擴(kuò)增過程中,熒光探針與目的基因片段結(jié)合,可被酶分解并產(chǎn)生熒光信號,此時熒光定量PCR儀可識別該熒光信號,同時根據(jù)其強(qiáng)弱變化繪制出相應(yīng)的實時擴(kuò)增曲線,進(jìn)而判定金黃色葡萄球菌是否檢出。
一、產(chǎn)品特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品DNA。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,靈敏性高。
3. 提供陽性對照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. 特異性高,引物是根據(jù)弓形蟲高度保守的重復(fù)序列設(shè)計。
5. 含上樣染料,PCR后可以直接上樣電泳。
二、PCR檢測試劑盒使用注意事項:
?。保甈CR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
?。常性噭┒紤?yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。
?。矗甈CR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
?。担噭┒紤?yīng)該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
?。叮噭┗驑悠窚?zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
?。罚甈CR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。