詳細介紹
本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!
產品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
胼胝質含量測試盒熒光法 | 100管/96樣 | 熒光法 | BK-01S6961 |
商品介紹:
測定意義: 胼胝質(callose)是圍繞每個篩孔的邊緣積累的碳水化合物,是一種以β-1,3鍵結合的葡聚糖,在植物的篩管代謝、配子體發(fā)育等生命活動中發(fā)揮著重要的調節(jié)作用,其合成、分解直接關系植物正常的生長代謝過程。 測定原理: 胼胝質與苯胺藍染料反應,產生熒光物質,在激發(fā)波長400nm,發(fā)射波長500nm下熒光強度。 自備儀器和用品: 研缽、冰、低溫離心機、熒光酶標儀、黑色96孔板、可調式移液器、乙醇和蒸餾水。 |
試劑組成和配制:
提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
實驗結果判斷我有妙招:
1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:
① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發(fā)生反應的物質要密封,并遠離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。
操作步驟:
1. 樣品的準備:
a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續(xù)檢測。
e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。
2. 試劑盒的準備工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據待檢測樣品(包括標準品) 數量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。
注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。
b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。
c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現稀釋現使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
GC瓊脂 GC Agar Base 250g
1瓶 NCI-H2227細胞株 NCI-H2227 低溫運輸和保存
ModifiedSclohtens'Broth(MSB) Modified Sclohtens' Broth 250g
25g L- 天 L-Asparagine 室溫保存
1000mL Tris-Glycine-Native Running Buffer,10X Tris-Glycine-Native Running Buffer,10X 常溫保存
10g 考馬斯亮藍R-250 Coomassie Blue R-250 常溫保存
即用型無菌袋裝液體
50次 柱式動物DNAout Column Animal DNAOUT 常溫
2 ug p426 GAL p426 GAL 低溫運輸,-20℃保存
厭氧肉肝湯 Anaerobic Beef Liver Broth 250g
1g 亞精胺三鹽酸鹽 Spermidine Trihydrochloride -20℃保存
胼胝質含量測試盒熒光法C21ORF56 21號染色體開放閱讀框56抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-Na+/K+-ATPase Alpha1(Ser 943) 磷酸化鈉鉀ATPα1多肽抗體 規(guī)格: 0.2ml
PDCD4 凋亡相關蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2ml
SNAI2/SLUG 鋅指轉錄因子Slug抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-CaM I (Ser 101) 磷酸化鈣調節(jié)素抗體 規(guī)格: 0.1ml
ODF3/CT135 瘤/睪抗原135抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-PTPN6(Tyr536) 磷酸化蛋白酪磷酸1C抗體 規(guī)格: 0.1ml
MRP2 多藥耐藥相關蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1ml
HIAT1 海馬豐富基因轉錄蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml
LEPREL2 皮屑樣蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml
Metronidazole 抗體 規(guī)格: 0.2ml
C11ORF46 11號染色體開放閱讀框46抗體 規(guī)格: 0.2ml
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