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當(dāng)前位置:首頁   >  產(chǎn)品中心  >  基因檢測PCR試劑盒  >  熒光定量PCR  >  50次豬瘟病毒RT-PCR試劑盒

豬瘟病毒RT-PCR試劑盒

簡要描述:豬瘟病毒RT-PCR試劑盒及公司相關(guān)產(chǎn)品NG108-15[108CC15]細(xì)胞,小鼠神經(jīng)細(xì)胞瘤與大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤之融合細(xì)胞 人結(jié)腸癌細(xì)胞,Colo205細(xì)胞 高背鯽魚尾鰭細(xì)胞;GBJd原兒茶醛,3,4-二羥基苯3,4-Dihydroxybenzaldehyde質(zhì)量規(guī)格:≥98%
大鼠氣管上皮細(xì)胞;RTE原兒茶醛(標(biāo)準(zhǔn)品)3,4-Dihydroxybenzaldehyde質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)

  • 產(chǎn)品型號:50次
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時間:2024-01-02
  • 訪  問  量:516

詳細(xì)介紹

PCR實驗步驟:
取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
兩相分離 1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,1530孵育23分鐘。412000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530孵育10分鐘后,于412000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,47000rpm離心5分鐘。
RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。

原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0E1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。產(chǎn)品僅用于科研
特異性強
PCR
反應(yīng)的特異性決定因素為:
引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
堿基配對原則;
Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱:豬瘟病毒RT-PCR試劑盒 
產(chǎn)品規(guī)格: 50
產(chǎn)品貨號:BK-P97056
儲存條件:-20避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。

產(chǎn)品特點:
高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴增;
高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進(jìn)行多個檢測;
高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
產(chǎn)品特點:
1.
使用化學(xué)修飾的熱啟動聚合酶,反應(yīng)特異性高,*程度地避免了非特異擴增;
2.
反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化,反應(yīng)靈敏快速,40個循環(huán)只需20多分鐘;
3.
抗干擾能力強,反應(yīng)重復(fù)性高,適合對土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測分析。
PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,zui后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。

特異性熒光標(biāo)記:
TaqMan

TaqMan
探針的特性:
15′端標(biāo)記有報告基團(Reporter, R),如FAMVIC
23′端標(biāo)記有熒光淬滅基團 Quencher, Q
3)探針完整,R所發(fā)射的熒光能量被Q基團吸收 ,無熒光, RQ分開,發(fā)熒光
4Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探針
相對定量通過內(nèi)標(biāo)定量:
內(nèi)標(biāo)(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定,受環(huán)境因素影響小,內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。

實驗注意事項:
1
RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2
)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3
)客戶盡量不要提供DNARNA樣品。
4
)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCRquantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括絕對定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNARNA的絕對定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
延胡索酸/富馬酸/ 反丁烯二酸  Fumaric acid  分子式:C4H4O4    分子量:116.07

三氧化鉬  Molybdic oxide  分子式: MoO3     分子量:143.94

山梨酸  Sorbic acid  分子式: C6H8O2           分子量:112.13

十二烷基磺酸鈉(CP)  Sodium dodecanesulfonate   分子式:C12H25O3S.Na      分子量:271.37

石英砂  Quartz sand  分子式:SiO2
酒石黃;檸檬黃;酸性黃 23  Tartrazine  分子式:C16H9N4Na3O9S2      分子量:534.36

考馬斯亮藍(lán)G250  Brilliant Blue G  分子式:C47H48N3NaO7S2         分子量:854.02

孔雀石綠  Malachite green  分子式:C23H25N2.Cl           分子量:364.91

麗春紅4R,新胭脂紅,亮麗春紅5R,酸性紅18  Brilliant ponceau 5R  分子式: C20H11N2Na3O10S3           分子量:604.47

麗絲胺羅丹明B,酸性紅52,磺酰羅丹明B  Sulforhodamine B  分子式:C27H29N2O7S2.Na        分子量:580.65
直接剛果紅,英文名或英文縮寫:Congo red,級別:超純,99%,規(guī)格:250毫克  小鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF)免疫試劑盒 Mouse eosinophil chemotactic factor,ECF ELISA Kit

6-FurfurylAminopurine 250mg/1g原裝 Sigma K3378  玉米特定基因序列(IVR)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

Dietxyladipate肥酸乙酯100CP  Humacellreceptor,TCRELISA試劑盒人T細(xì)胞受體(TCR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

碳醋銫 CqsiuM ccronctq 234-17-8  ELISAKitADRA1A小鼠能a1A受體規(guī)格:48T/96T

2-1shēng huà shì jì容量:1公斤  HumanAspaateaminoansferase,ASTELISAKit人天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
豬瘟病毒RT-PCR試劑盒伊色林,英文名或英文縮寫:Eserine,級別:BR98%,規(guī)格:500  豬血管生成素2(ANG-2)免疫試劑盒 Porcine ANG-2 ELISA Kit

3954-13-01-異清酸戊酯, 97%Pentyl isocyanate  HumanclusterOfdiffereiation,CD4ELISAKit 人白細(xì)胞分化抗原4(CD4)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

AGAROSEI/TBEBLEND1.0%瓊脂糖 - TBE 混合物 1.0%生物技術(shù)級100GRT  Hum


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