當(dāng)前位置:首頁 > 產(chǎn)品中心 > 基因檢測PCR試劑盒 > 熒光定量PCR > 50次羊肺腺瘤病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒
簡要描述:羊肺腺瘤病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒及公司相關(guān)產(chǎn)品鎢酸1克保存:-20℃ 中心體紡錘體極相關(guān)蛋白1(CSPP1)ELISA試劑盒 ,英文名: CSPP1 ELISA KitStarchPotato 100g/2kg原裝 Sigma S4251 Humanurokinase,UKELISA試劑盒人尿激酶(UK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T色酸肉湯shēng huà shì j
產(chǎn)品分類
詳細(xì)介紹
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
產(chǎn)品名稱:羊肺腺瘤病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格: 50次
產(chǎn)品貨號(hào):BK-P96957
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
原理是由一對(duì)引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。產(chǎn)品僅用于科研
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)聚合酶,反應(yīng)特異性高,*程度地避免了非特異擴(kuò)增;
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化,反應(yīng)靈敏快速,40個(gè)循環(huán)只需20多分鐘;
3. 抗干擾能力強(qiáng),反應(yīng)重復(fù)性高,適合對(duì)土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,zui后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
特異性熒光標(biāo)記:
TaqMan法
TaqMan探針的特性:
(1)5′端標(biāo)記有報(bào)告基團(tuán)(Reporter, R),如FAM、VIC等
(2)3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) (Quencher, Q)
(3)探針完整,R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ,無熒光, R與Q分開,發(fā)熒光
(4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探針
相對(duì)定量通過內(nèi)標(biāo)定量:
內(nèi)標(biāo)(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定,受環(huán)境因素影響小,內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括絕對(duì)定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的絕對(duì)定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
苞肉粒1米 HumancecropinB,CecBELISA試劑盒人殺菌肽B(CecB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鹽酸強(qiáng)力霉素/鹽酸多西環(huán)素質(zhì)量規(guī)格:>97%,BRDoxycycline HCl 人1酯酰肌醇特異性1酯酶C(PIPLC)ELISA檢測試劑盒Humanphosphoinositide-specificphospholipaseC,PIPLCELISAKit 96T/48T humanai-neuophilcytoplasmicaibody,cANCAELISA試劑盒人抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體(cANCA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鹽酸強(qiáng)力霉素/鹽酸多西環(huán)素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Doxycycline HCl 大鼠糖皮質(zhì)類受體(GR)試劑盒 Rat glucocoicoid receptor,GR ELISA Kit Humancatecholamine,CAELISAKit人兒茶酚胺(CA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
維生素K3,甲萘醌質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRMenadione 英文名稱RatAquaporin2ELISAKit大鼠水通道蛋白2(AQP2)規(guī)格:96T/48T 人EB病毒IgM(EBv IgM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
維生素K3,甲萘醌(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品Menadione 化妝品糖精(saccharin)含量薄層色譜法定性檢測試劑盒20 兔血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)試劑盒 Rabbit Vascular Endothelial cell Growth Factor,VEGF ELISA Kit
十六醇(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC))質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)1-Hexadecanol 大鼠白三烯C4(LTC4)ELISA檢測試劑盒RatLeukoieneC4,LT-C4ELISAKit 96T/48T Humanai-EJ-aibody,EJ/GlyRSELISA試劑盒人EJ抗體/抗甘氨酰NA合成酶抗體(EJ/GlyRS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
1,6-己二醇(standard for GC)質(zhì)量規(guī)格:standard for GC1,6-Hexanediol 人型肝炎病毒(HCV)核心抗原(HCV core Ag)試劑盒 Human Hepatitis C Virus (HCV) Core Aigen,HCV core Ag ELISA kit HumanBone-specificAlkphaseB,ALP-BELISAKit人骨特異性堿性1酸酶B(ALP-B)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
十七烷(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC))質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)Heptadecane RatypsinELISAKit大鼠胰蛋白酶(ypsin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 人TH糖蛋白(THP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
增甘1(>97.0%(T))質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(T)Glycine-N,N-bis(methylenephosphonic Acid) MMLV(H點(diǎn)突變)2500U 兔子D-乳酸 試劑盒 Rabbit D-lactic acid ELISA Kit
羊肺腺瘤病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒F11R Others Mouse 小鼠 F11R / JAM-A / JAM-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) PrismProteinMarkerPrism 蛋白Marker生物技術(shù)級(jí)深藍(lán)至紫色粘稠液體FROZENsigma
人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;BE(2)-M17麗絲胺羅丹明B Sulforhodamine B salt 3520-42-1 5G 通用試劑
人毛發(fā)干細(xì)胞(HHDPC)( 5×105 )染料木苷 Gqnistin 29-29-9
人臍靜脈平滑肌細(xì)胞FORMALDEHYDE,37%SOLU
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