當(dāng)前位置:首頁 > 產(chǎn)品中心 > 基因檢測PCR試劑盒 > 熒光定量PCR > 50次伯氏疏螺旋體
簡要描述:伯氏疏螺旋體及公司相關(guān)產(chǎn)品錫粒shēng huà shì jì容量:25克 ELISAKitHSP-90小鼠熱休克蛋白90規(guī)格:48T/96T(Soy)(大豆卵1脂) HumanApolipoproteinH,apo-HELISAKit人載脂蛋白H(Apo-H)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48Tγ-L-谷酰一水合物1公斤 人肝素結(jié)合性表皮生長因子(HB-EGF)ELISA 試劑盒 96
產(chǎn)品分類
詳細介紹
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。產(chǎn)品僅用于科研
特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱:伯氏疏螺旋體
產(chǎn)品規(guī)格: 50次
產(chǎn)品貨號:BK-P96924
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
產(chǎn)品特點:
1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動聚合酶,反應(yīng)特異性高,*程度地避免了非特異擴增;
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化,反應(yīng)靈敏快速,40個循環(huán)只需20多分鐘;
3. 抗干擾能力強,反應(yīng)重復(fù)性高,適合對土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復(fù)雜樣本中的靶基因進行檢測分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,zui后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。
特異性熒光標(biāo)記:
TaqMan法
TaqMan探針的特性:
(1)5′端標(biāo)記有報告基團(Reporter, R),如FAM、VIC等
(2)3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團 (Quencher, Q)
(3)探針完整,R所發(fā)射的熒光能量被Q基團吸收 ,無熒光, R與Q分開,發(fā)熒光
(4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探針
相對定量通過內(nèi)標(biāo)定量:
內(nèi)標(biāo)(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在細胞中的表達量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定,受環(huán)境因素影響小,內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細胞或基因組數(shù)量。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括絕對定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的絕對定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
GlycogenTypeII 1g/5g/25g原裝 Sigma G8751 小鼠β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)ELISA試劑盒 ,英文名: β-EPR ELISA Kit
鹽酸維拉帕米(標(biāo)準(zhǔn)品)Verapamil HCl質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠粘蛋白/粘液素1(MUC1)ELISA試劑盒 ,英文名: MUC1 ELISA Kit ELISAKitIGFBP-3豬胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3規(guī)格:48T/96T
霉酚酸; 麥考酚酸;MPAMycophenolic acid質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠內(nèi)(ET)ELISA檢測試劑盒Mouseendotoxin,ETELISAKit 96T/48T HumanfactorB,BFELISAKit人B因子(BF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
霉酚酸; 麥考酚酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Mycophenolic acid質(zhì)量規(guī)格:HPLC>97%,標(biāo)準(zhǔn)品 人相關(guān)抗原7(SPAG7)試劑盒 Human sperm associated aigen 7,SPAG7 ELISA Kit 人維生素B12(VB12)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
鹽酸卡替洛爾(標(biāo)準(zhǔn)品)2(1H)-QUINOLINONE質(zhì)量規(guī)格:鑒別 RatAndrostenedione,ASDELISAKit大鼠雄烯二同(ASD)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 豬催乳素(PRL)試劑盒 Pig prolactin,PRL ELISA Kit
薯蕷皂苷A質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Prosapogenin A 人γ肽(Pγ)ELISA檢測試劑盒HumanPeptideγ,PγELISAKit 96T/48T HumanAquaporin2,AQP-2ELISA試劑盒人水通道蛋白2(AQP-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Rocilinostat (ACY-1215)質(zhì)量規(guī)格:>98%,選擇性組蛋白脫乙酰酶(HDAC6)抑制劑ACY1215 大鼠腎上腺髓質(zhì)素(ADM)試劑盒 Rat adrenomedullin,ADM ELISA Kit HumanCompleme1q,C1qELISAKit人補體1q(C1q)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
肉豆蔻酸,十四烷酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:GC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Myristic acid 英文名稱RatDHEA-SELISAKit大鼠去氫表雄同(DHEA-S)規(guī)格:96T/48T 人28S抗核糖體抗體(28S rRNP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
肉豆蔻酸,十四烷酸質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BRMyristic acid 活體細胞半胱氨酸蛋白酶-10(CASPASE-10)活性原位熒光染色檢測試劑盒20 山羊脂聯(lián)素(ADP)試劑盒 Goat adiponectin,ADP ELISA Kit
伯氏疏螺旋體小鼠條紋神經(jīng)細胞(MN-s)(1×106)1,2,3,5-Tetra-O-acetyl-β-D-ribofuranose四乙酰核糖10毫升,98%
狗腎細胞;Super Tube杜邦制冷劑 1,1,1,2-Tqtrcfluoroqthcnq 811-97-
小鼠T瘤細胞(雞OVA基因修飾);E.G7-OVA 小鼠胎兒成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mL炳二晴 99% Mclonic ccid 141-8-
CHO, 中國倉鼠卵巢細胞系 其它2-硝基本-α-D-半乳糖苷,英文名或英文縮寫:ONPG,級別:共軛級
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