當(dāng)前位置:首頁 > 產(chǎn)品中心 > PCR試劑盒 > 源性成分PCR試劑盒 > 48T腰果源性成分PCR檢測(cè)試劑盒 PCR-熒光探針法
簡(jiǎn)要描述:腰果源性成分PCR檢測(cè)試劑盒 PCR-熒光探針法及公司相關(guān)產(chǎn)品葫蘆素D;葫蘆苦素DCucurbitacin D質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠死亡關(guān)聯(lián)蛋白激酶3(DAPK3)ELISA試劑盒 ,英文名: DAPK3 ELISA Kit ELISAKitCr小鼠骨膠原交聯(lián)規(guī)格:48T/96T堿性品紅(分析標(biāo)準(zhǔn)品)Basic Fuchsin質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 豚鼠球蛋白G(IgG)E
詳細(xì)介紹
產(chǎn)品僅用于科研原理是由一對(duì)引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱:腰果源性成分PCR檢測(cè)試劑盒 PCR-熒光探針法
產(chǎn)品規(guī)格: 48T
產(chǎn)品貨號(hào):BK-P97254
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)聚合酶,反應(yīng)特異性高,*程度地避免了非特異擴(kuò)增;
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化,反應(yīng)靈敏快速,40個(gè)循環(huán)只需20多分鐘;
3. 抗干擾能力強(qiáng),反應(yīng)重復(fù)性高,適合對(duì)土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測(cè)分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,zui后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
特異性熒光標(biāo)記:
TaqMan法
TaqMan探針的特性:
(1)5′端標(biāo)記有報(bào)告基團(tuán)(Reporter, R),如FAM、VIC等
(2)3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) (Quencher, Q)
(3)探針完整,R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ,無熒光, R與Q分開,發(fā)熒光
(4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探針
相對(duì)定量通過內(nèi)標(biāo)定量:
內(nèi)標(biāo)(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定,受環(huán)境因素影響小,內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括絕對(duì)定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的絕對(duì)定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
磺溴酞鈉(>98%,BR)Sulfobromophthalein di salt hydrate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 波形蛋白(Vimein)結(jié)合分子(bindingmolecules)檢測(cè)試劑盒20 Human6-keto-prostaglandin,6-K-PGELISAKit 人6酮前列腺素(6-K-PG)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Sulfo-MBSSulfo-MBS質(zhì)量規(guī)格:BR RatFMS-liketyrosinekinase3ligand,Flt-3LELISA試
甲基紅鈉鹽(ACS reagent,95 %)Methyl Red salt質(zhì)量規(guī)格:ACS reagent,95 % Duckcyclicadenosinemonophosphate,cAMPELISA試劑盒鴨環(huán)1酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 人抗肌聯(lián)蛋白抗體(TTN)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
間甲基紅m-Methyl red質(zhì)量規(guī)格:指示劑 載玻片細(xì)胞組蛋白H3-K4甲基化熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒(針對(duì)一甲基)10/20 小鼠結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)試劑盒 Mouse connective tissue growth factor,CTGF ELISA Kit
紫脲酸銨(IND)Murexide質(zhì)量規(guī)格:IND MouseD-LactateDehydrogenase,D-LDHELISAKit小鼠D-乳酸脫氫酶(D-LDH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 音猬因子(SHH)ELISA試劑盒 ,英文名: SHH ELISA Kit
甲基4-羥基-2--2H-1,2-苯并噻嗪-3-羧酸鹽 1,1-二氧化物Methyl 4-Hydroxy-2-methyl-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxylate 1,1-Dioxide質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 小鼠水通道蛋白3(AQP-3)ELISA試劑盒 ,英文名: AQP-3 ELISA Kit Mouse16-αHydroxyesogen1,16-αOHE-1ELISA試劑盒小鼠16α羥基雌同1(16-αOHE-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
TCN2 Others Mouse 小鼠 TCN2 / anscobalamin-II 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) Toosendanin苦楝素10毫克超,98%
PA319 人大腸癌細(xì)胞二十二醇 1-Docoscnol 661-19-8
CL-0466WI38/VA13(SV-40Z轉(zhuǎn)化肺成纖維細(xì)胞)5×106cells/瓶×2L-正纈酸shēng huà shì jì容量:1公斤
小鼠神經(jīng)干細(xì)胞(EGFP標(biāo)記)wo7iumphosphotungstate十二鎢酸嶙酸鈉水合物500克CP,98%
人細(xì)胞;1301 人腸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL589-92-44-甲基4-metxylcyclohexanone
腰果源性成分PCR檢測(cè)試劑盒 PCR-熒光探針法CSF1 Protein Mouse 重組小鼠 M-CSF / CSF-1 蛋白 (His 標(biāo)簽)Aminometxylresin甲基樹脂25克BR
Tca-8113(人舌鱗癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 野生型人c-kit受體細(xì)胞株;A7d1,2,4,5-本四安四言醋鹽 1,2,4,5-BqNZqNqTqTRcMINq TqTRcxy7noCHLORIDq 4206-66-2
人神經(jīng)元cDNAHN cDNA言醋二安四環(huán)速 Minocyclinq xy7nochloridq 13614-98-7
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
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