當前位置:首頁 > 產(chǎn)品中心 > PCR試劑盒 > 源性成分PCR試劑盒 > 48T 0.2PCR管馬源性成分PCR檢測試劑盒 PCR-熒光探針法
簡要描述:馬源性成分PCR檢測試劑盒 PCR-熒光探針法及公司相關(guān)產(chǎn)品環(huán)1酸腺苷,環(huán)腺苷酸(標準品)cAMP質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品 英文名稱Ratt-PAELISAKit大鼠組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)規(guī)格:96T/48T 人分泌成分(SC)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝5'-胞苷酸(CMP)Cytidine 5'-monophosphate 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
詳細介紹
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?/span>4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。產(chǎn)品僅用于科研
特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱:馬源性成分PCR檢測試劑盒 PCR-熒光探針法
產(chǎn)品規(guī)格: 48T 0.2PCR管
產(chǎn)品貨號:BK-P97219
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
產(chǎn)品特點:
1. 使用化學修飾的熱啟動聚合酶,反應(yīng)特異性高,*程度地避免了非特異擴增;
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化,反應(yīng)靈敏快速,40個循環(huán)只需20多分鐘;
3. 抗干擾能力強,反應(yīng)重復性高,適合對土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復雜樣本中的靶基因進行檢測分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,zui后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。
特異性熒光標記:
TaqMan法
TaqMan探針的特性:
(1)5′端標記有報告基團(Reporter, R),如FAM、VIC等
(2)3′端標記有熒光淬滅基團 (Quencher, Q)
(3)探針完整,R所發(fā)射的熒光能量被Q基團吸收 ,無熒光, R與Q分開,發(fā)熒光
(4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探針
相對定量通過內(nèi)標定量:
內(nèi)標(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在細胞中的表達量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定,受環(huán)境因素影響小,內(nèi)標定量結(jié)果代表了樣本中所含細胞或基因組數(shù)量。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括絕對定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的絕對定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
加巴噴丁-d4Gabapentin-d4質(zhì)量規(guī)格:美國進口 MouseInhibin,INH-AELISA試劑盒小鼠抑制素A(INH-A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 異質(zhì)性胞核核糖核蛋白L(hNP L)ELISA試劑盒 ,英文名: hNP L ELISA Kit
加巴噴丁-內(nèi)酰胺Gabapentin-lactam質(zhì)量規(guī)格:美國進口 小鼠瘦素(LEP/Leptin)ELISA試劑盒 ,英文名: LEP/Leptin ELISA Kit MouseADisiegrinAndMetallopr
堿式乙酸鋁(>50%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>50%,BRAluminum acetate, basic 雞γ干擾素(IFN-γ)ELISA檢測試劑盒ChickenIerferonγ,IFN-γELISAKit 96T/48T Humancommonacelymphocyticleukaemiaaigen,CALLAELISA試劑盒人普通急性細胞白血病抗原(CALLA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
氟化鋁三水(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRAluminum fluoride trihydrate 人Ⅱ型膠原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)試劑盒 Human type Ⅱ collagen helical peptide,HELIX-ⅡELISA Kit HumanFactor-relatedApoptosis,FASELISAKit人凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
酸性氧化鋁(>90%,BC)質(zhì)量規(guī)格:Al2O3>90%,BCAluminum oxide, active 英文名稱Mouselymphocytefunctionassociatedaigen-3ELISAKit小鼠LFA-3(CD58)規(guī)格:96T/48T 牛二酰輔酶A(malonyl CoA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
堿性氧化鋁(>90%,BC)質(zhì)量規(guī)格:Al2O3>90%,BCAluminum oxide, active 冰凍切片組織MAPK蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20 人壞死因子超家族15(TL1A/TNFSF15)試劑盒 Human tumor necrosis factor superfamily 15,TL1A/TNFSF15 ELISA Kit
豚鼠皮膚細胞;GP-S1N-去甲酰-N-芐氧羰基奧利司他質(zhì)量規(guī)格:美國進口N-Deformyl-N-benzyloxycarbonyl Orlistat
IFNA14 Others Mouse 小鼠 IFNA14 / Ierferon alpha-14 人細胞裂解液 (陽性對照) (2S,3R,5S)-5-[(N-甲酰-L-亮氨酰)氧]-2-己基-3-羥基十六烷酸(奧利司他雜質(zhì))質(zhì)量規(guī)格:美國進口(2S,3R,5S)-5-[(N-Formyl-L-leucyl)oxy]-2-hexyl-3-hydroxyhexadecanoic Acid (Orlistat Impurity)
JF305 胰腺癌C17鞘氨醇質(zhì)量規(guī)格:美國進口C17 Sphingosine
DU 145人前列腺癌細胞 DU 145 human prostate cancer cell F-12+10%FBSD-赤-鞘氨醇 C-15質(zhì)量規(guī)格:美國進口D-erythro-Sphingosine C-15
CTF1 Protein Human 重組人 Cardioophin-1 / CTF1 蛋白草酸亞錫(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRTin (II) oxalate
馬源性成分PCR檢測試劑盒 PCR-熒光探針法CSF2 Protein Human 重組人 GM-CSF / CSF2 蛋白 (Fc 標簽)BOC-L-羥脯酸shēng huà shì jì容量:25克
U-2 OS(人骨肉瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠胚胎成纖維細胞;3T6-Swiss albino季銨鹽 336 cDOGqN(R) 464 63393-96-4
人前列腺成纖維細胞裂解物HPrFL化銫 Cesium chloride (for molecular biology... 7647-17-8 5G 核酸衍生物
HA Oth
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