當前位置:首頁 > 產(chǎn)品中心 > 基因檢測PCR試劑盒 > RNA/DNA提取試劑盒 > DNA探針變性液
簡要描述:DNA探針變性液及公司相關產(chǎn)品氫氧化鋁1克 GM-CSFAb人粒細胞巨噬細胞集落刺激因子抗體規(guī)格:48T/96T(IV型膠原酶) 小鼠BH3結構域凋亡誘導蛋白(Bid)ELISA試劑盒 ,英文名: Bid ELISA Kit親和硅烷shēng huà shì jì容量:25000u 倉鼠甲狀腺結合球蛋白(TBG)ELISA檢測試劑盒Hamstehyroxine-BindingGlobul
產(chǎn)品分類
詳細介紹
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。產(chǎn)品僅用于科研
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱:DNA探針變性液
產(chǎn)品規(guī)格: 詳見說明
產(chǎn)品貨號:BK-P96602
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
產(chǎn)品特點:
1. 使用化學修飾的熱啟動聚合酶,反應特異性高,*程度地避免了非特異擴增;
2. 反應緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化,反應靈敏快速,40個循環(huán)只需20多分鐘;
3. 抗干擾能力強,反應重復性高,適合對土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復雜樣本中的靶基因進行檢測分析。
在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,zui后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。
特異性熒光標記:
TaqMan法
TaqMan探針的特性:
(1)5′端標記有報告基團(Reporter, R),如FAM、VIC等
(2)3′端標記有熒光淬滅基團 (Quencher, Q)
(3)探針完整,R所發(fā)射的熒光能量被Q基團吸收 ,無熒光, R與Q分開,發(fā)熒光
(4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探針
相對定量通過內(nèi)標定量:
內(nèi)標(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在細胞中的表達量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定,受環(huán)境因素影響小,內(nèi)標定量結果代表了樣本中所含細胞或基因組數(shù)量。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括絕對定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNA或RNA的絕對定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術:引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
540-63-61,2-乙二;二流代以兒醇;1,2-二巰基;1,2-二1, 2-Ethanedithiol;Ditxioglyol;1,2-DiMercaptoethane;Dithioetxyleneglycol;etxylene Mercaptan;etxylone diMercaptan 大鼠結合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)免疫試劑盒 Rat Haptoglobin,Hpt/HP ELISA KIT
細胞色素C(豬源)Cytochrome C質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR,來源豬心 小鼠脫氧核糖核酸酶Ⅰ樣2(DNASE1L2)ELISA試劑盒 ,英文名: DNASE1L2 ELISA Kit ELISAKitsCD30小鼠可溶性白細胞分化抗原30規(guī)格:48T/96T
蘆丁/蕓香葉苷Rutin質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR 兔6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA檢測試劑盒Rabbit6-keto-prostaglandinF1a,6-K-PGF1aELISAKit 96T/48T Humanai-hepatitisBviruscoreIgM,HBc-IgMaibodyELISAKit人抗乙型肝炎病毒核心IgM抗體(HBcAb-IgM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
蘆丁/蕓香葉苷(標準品)Rutin質(zhì)量規(guī)格:≥98%,標準品 牛肉堿棕櫚酰轉移酶-Ⅰ(CPT-Ⅰ)試劑盒 Bovine carnitine palmitoylansferase I,CPT-Ⅰ ELISA kit 人可溶性1脂酶A2(sPL-A2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
新橙皮苷二氫查爾酮Neosperidin dihydrochalcone質(zhì)量規(guī)格:≥95%,BR 英文名稱HumanSDF-1—Somalcellderivedfactor1ELISAkit人基質(zhì)衍生因子-1B(SDF-1β)ELISAkit規(guī)格:96T/48T 小鼠尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)試劑盒 Mouse urokinase plasminogen activator,uPA ELISA kit
匹卡米隆Pikamilone質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人胰腺癌標志物CA242ELISAKit人胰腺癌標志物CA242ELISAKit,48T/96T人胰腺癌標志物CA242ELISAKit,48T/96T規(guī)格:48T/96T 松弛素(RLN)ELISA試劑盒 ,英文名: RLN ELISA Kit
雙乙酸鈉 diacetate質(zhì)量規(guī)格:>99% 小鼠堿性1酸酶(ALP)ELISA試劑盒 ,英文名: ALP ELISA Kit MouseαN-acetylglucosaminidase,αNAGELISA試劑盒小鼠αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
L-甘-谷二肽,甘氨酰-L-谷氨酰胺一水合物Glycyl-L-glutamine monohydrate質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 大鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA檢測試劑盒Ratheatshockprotein90,hSP-90ELISAKit 96T/48T GoatP-Selectin/CD62P/GMP-140ELISA試劑盒山羊P選擇素(P-Selectin/CD62P/GMP140)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
6-羥基多沙唑嗪6-Hydroxy Doxazosin質(zhì)量規(guī)格:美國進口 人雌激素誘導蛋白PS2 試劑盒 Human Esogen-induced protein pS2 ELISA Kit Humanai-calmodulinspecificaibody,CaM-abELISAKit人抗鈣調(diào)素特異抗體(CAM-ab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
DNA探針變性液10030-67-8D(+)三糖D-MELEZITOSE DIHYDRATE 組蛋白脫乙?;?/span>(HDAC)總活性比色法定量檢測試劑盒20次
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