當前位置:首頁 > 產(chǎn)品中心 > 基因檢測PCR試劑盒 > RNA/DNA提取試劑盒 > Citrate Buffered Saline
簡要描述:Citrate Buffered Saline及公司相關(guān)產(chǎn)品色素(水溶)100克 ELISAKiF人類風濕因子規(guī)格:48T/96T(無瓊脂)) 小鼠Apelin小鼠12蛋白(AP12)ELISA試劑盒 ,英文名: AP12 ELISA Kit鐵(III),英文名或英文縮寫:Ferric tartrate,級別:3N,規(guī)格:250克 人膠原酶II(CollagenaseII)ELISA檢測
產(chǎn)品分類
詳細介紹
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。產(chǎn)品僅用于科研
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱:Citrate Buffered Saline
產(chǎn)品規(guī)格: 詳見說明
產(chǎn)品貨號:BK-P96524
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
產(chǎn)品特點:
1. 使用化學修飾的熱啟動聚合酶,反應特異性高,*程度地避免了非特異擴增;
2. 反應緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化,反應靈敏快速,40個循環(huán)只需20多分鐘;
3. 抗干擾能力強,反應重復性高,適合對土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復雜樣本中的靶基因進行檢測分析。
在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,zui后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。
特異性熒光標記:
TaqMan法
TaqMan探針的特性:
(1)5′端標記有報告基團(Reporter, R),如FAM、VIC等
(2)3′端標記有熒光淬滅基團 (Quencher, Q)
(3)探針完整,R所發(fā)射的熒光能量被Q基團吸收 ,無熒光, R與Q分開,發(fā)熒光
(4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探針
相對定量通過內(nèi)標定量:
內(nèi)標(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在細胞中的表達量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定,受環(huán)境因素影響小,內(nèi)標定量結(jié)果代表了樣本中所含細胞或基因組數(shù)量。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括絕對定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNA或RNA的絕對定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
2-(二叔丁基膦)聯(lián)本99% 2-(Di-tqrt-butylphosphino)biphqnyl 4311-21-7 Humanbonealkalinephosphatase,BALPELISAKit 人骨堿性磷酸酶(BALP)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
新橙皮苷二氫查爾酮(標準品)Neosperidin dihydrochalcone質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 動物骨DNA萃取試劑盒20 壞死因子受體超家族成員18(TNFRSF18)ELISA試劑盒 ,英文名: TNFRSF18 ELISA Kit
氧化苦參堿Oxymatrine質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR RatProAialNaiureticPeptide,Pro-ANPELISA試劑盒大鼠前心肽(Pro-ANP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T Humaumournecrosisfactorrelatedweakinducerofapoptosis,TWEAKELISA試劑盒人壞死因子相關(guān)弱凋亡誘導因子(TWEAK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
盧立康唑Luliconazole質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNASE1)ELISA試劑盒 ,英文名: DNASE1 ELISA Kit ELISAKitsP-selectin小鼠可溶性P選擇素規(guī)格:48T/96T
5-硝基-1,10-菲咯啉;5-硝基鄰菲啰啉5-Nitro-1,10-phenanthroline質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR 兔可溶性凋亡相關(guān)因子(sFAS/Apo-1)ELISA檢測試劑盒RabbitsolubleFactor-relatedApoptosis,sFAS/Apo-1ELISAKit 96T/48T Humanai-hepatitisBviruscoreaibody,HBcAbELISAKit人抗乙型肝炎病毒核心抗體(HBcAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
氫化大豆卵1脂;氫化卵1脂HSPC;Lecithins Hydrogenated質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 蛋白樣品多粘菌素層析法去內(nèi)試劑盒20 轉(zhuǎn)基因植物PAT基因核酸檢測試劑盒 48T
鏈霉素(標準品)Streptomycin質(zhì)量規(guī)格:效價測定 RatMullerianInhibitingSubstance/Ai-Mullerianhormone,MIS/AMHELISA試劑盒大鼠繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素(MIS/AMH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T Humansolublecytokinereceptor,sCKRELISA試劑盒人可溶性細胞因子受體(sCKR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Tenovin-1TENOVIN-1質(zhì)量規(guī)格:>98% 小鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒 ,英文名: cTn-Ⅰ ELISA Kit ELISAKitVD3小鼠維生素D3規(guī)格:48T/96T
新霉素(標準品)neomycin質(zhì)量規(guī)格:效價測定 小鼠β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)ELISA檢測試劑盒MouseBeta-Endorphieceptor,β-EPRELISAKit 96T/48T HumanBrainderivedneuroophicfacor,BDNFELISAKit人腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Citrate Buffered SalineR-Alpine-硼完 B-ISOPINOCcMPHqYL-9-BORcBICYCLO[3.3.1]NONcNq 7364-47- TEM電鏡石蠟切片免疫組織化學AP酶聯(lián)NBT/BCIP直接檢測試劑盒(含AP一抗)10次
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