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甲醛脫氫酶(FDH)測(cè)試盒紫外分光光度法

簡(jiǎn)要描述:甲醛脫氫酶(FDH)測(cè)試盒紫外分光光度法輔酶Ⅰ系列公司正在出售的產(chǎn)品:XLD培養(yǎng)基平板(9cm) 英文名稱:Xylose Lysine Desoxycholate Medium 產(chǎn)品規(guī)格:10個(gè)/包 中國藍(lán)瓊脂平板(9cm) 英文名稱:China Blue Agar 產(chǎn)品規(guī)格:10個(gè)/包 麥康凱瓊脂平板(9cm) 英文名稱:MacConkey Agar 產(chǎn)品規(guī)格:10個(gè)/包 醇麥康凱瓊脂(SMAC

  • 產(chǎn)品型號(hào):
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時(shí)間:2023-12-29
  • 訪  問  量:566

詳細(xì)介紹

實(shí)驗(yàn)方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點(diǎn):

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測(cè)定。

特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。

產(chǎn)品名稱:甲醛脫氫酶(FDH)測(cè)試盒紫外分光光度法

產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣

檢測(cè)方法:紫外分光光度法

產(chǎn)品貨號(hào):BK-01S6346

產(chǎn)品分類:輔酶Ⅰ系列
商品介紹:

測(cè)定意義:

甲醛是一種能與蛋白質(zhì)、核酸和脂類產(chǎn)生非特異性反應(yīng)的活潑化合物,對(duì)所有生物都具有很高毒性。甲醛脫氫酶作為含鋅中等鏈醇脫氫酶(ADH)的家庭成員之一,廣泛存在于原核和真核生物中,該酶能利用NAD+作為輔酶,將有毒的甲醛氧化,是甲醛氧化途徑中的關(guān)鍵酶。

測(cè)定原理

甲醛脫氫酶催化甲醛和NAD+產(chǎn)生NADH,在340nm處的吸光值會(huì)增加,測(cè)定340nm處的吸光值變化,可計(jì)算得到甲醛脫氫酶的活性。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、離心機(jī)、分光光度計(jì)、1mL玻璃比色皿、蒸餾水。

所需的儀器和用品:

可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:

建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)

樣本和試劑浪費(fèi)!

1、樣本制備

組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進(jìn)行提取

 

細(xì)菌/細(xì)胞樣本:

先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。

【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10

4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進(jìn)行提取。 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。

QQ截圖20220307153537.png 

注意事項(xiàng):

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。

2、對(duì)照管只需要做一管。

3、若對(duì)照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?

對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間30min可以延長到40min)。對(duì)照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測(cè),通??梢允箿y(cè)定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

500mL Blotto in TBS   Blotto in TBS   常溫保存

1g 分子生物學(xué)級(jí)糖原干粉 Glycogen Powder 常溫

2 ug pGL4.30[Luc2P/NFAT-RE/Hygro] pGL4.30[Luc2P/NFAT-RE/Hygro] 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

煌綠瓊脂培養(yǎng)基 Brilliant Green Agar Medium 250g

1瓶 HCCLM3細(xì)胞株 HCCLM3 低溫運(yùn)輸和保存

10次 百萬堿基級(jí)真菌DNAout  

500U Tth 核酸內(nèi)切 IV Tth Endonuclease IV -20℃保存

250mL RIPA Buffer—2  RIPA Buffer—2  常溫保存

1 管 DH10B大腸桿菌 DH10B E.coli Strain -80℃保存

2 ug pREV pREV 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

O157菌成套生化鑒定管  11種*1套/盒*10盒

甲醛脫氫酶(FDH)測(cè)試盒紫外分光光度法FMDV Polyprotein (3A protein)   口蹄疫毒A型抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-MAPK14(Tyr323)  磷酸化p38MAPK抗體 規(guī)格: 0.1ml

TET1/CXXC6  Ten-eleven轉(zhuǎn)運(yùn)基因1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlNRP1/CD304  神經(jīng)纖毛蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml

MIP4/CCL18  巨噬細(xì)胞癥蛋白18抗體 規(guī)格: 0.1mlDNase gamma  脫氧核糖核酸γ抗體 規(guī)格: 0.2ml

MRF/C11orf9  髓鞘基因調(diào)控因子抗體 規(guī)格: 0.2mlMYBBP1A/p53 activated protein 2  p53激活蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml

Goat Anti-Mouse IgG/Cy5.5  Cy5.5標(biāo)記的羊抗小鼠IgG 規(guī)格: 0.1mlRabbit Anti-Avidin  兔抗親和素 規(guī)格: 1mg

PGF2 α  前列素F2a抗體 規(guī)格: 0.2mlalpha 2 Macroglobulin  α2巨球蛋白(α-2M)抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-KLF5(Ser275)  磷酸化KLF5抗體 規(guī)格: 0.1mlMouse Anti-Bov IgG/PE  PE標(biāo)記的小鼠抗牛IgG 規(guī)格: 0.1ml

SFR19  剪接因子,/絲豐富19 規(guī)格: 0.2mlPhospho-SATB1 (Ser47)  磷酸化核基質(zhì)結(jié)合區(qū)結(jié)合蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml

APOC2  載脂蛋白C2抗體 規(guī)格: 0.1mlAPEX2  嘌呤嘧啶核酸內(nèi)切2抗體 規(guī)格: 0.1ml

MAP3K2/MEKK2  絲裂原活化蛋白激激2抗體 規(guī)格: 0.1mlDonkey Anti-human IgG/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標(biāo)記的驢抗人IgG 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/Cy3  Cy3標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc 規(guī)格: 0.1mlCDC3/CDC10/Septin 7  細(xì)胞周期調(diào)控因子3抗體 規(guī)格: 0.2ml

CD1A  T淋巴細(xì)胞CD1A抗體 規(guī)格: 0.1mlPhospho-HER3 (Tyr1197)  磷酸化HER3受體抗體 規(guī)格: 0.1ml 

 


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