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簡(jiǎn)要描述:過(guò)氧化氫(H2O2)測(cè)試盒可見分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:Kovacs氏靛基質(zhì)試劑盒 英文名稱:Kovacs's indole Box 產(chǎn)品規(guī)格:5ml*2 甲基紅指示劑盒 英文名稱:Methyl Red Indicator Box 產(chǎn)品規(guī)格:5ml*2 哥倫比亞MUG培養(yǎng)基 英文名稱:Columbia- MUG Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g BDS培養(yǎng)基 英文名稱:BDS Medium 產(chǎn)
詳細(xì)介紹
商品介紹:
測(cè)定意義: H2O2是生物體內(nèi)最常見的活性氧分子,主要由SOD和XOD等催化產(chǎn)生,由CAT和POD等催化降解。H2O2不僅是重要的活性氧之一,也是活性氧相互轉(zhuǎn)化的樞紐。一方面,H2O2可以直接或間接地氧化細(xì)胞內(nèi)核酸,蛋白質(zhì)等生物大分子,并使細(xì)胞膜遭受損害,從而加速細(xì)胞的衰老和解體;另一方面H2O2也是許多氧化應(yīng)急反應(yīng)中的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子。 測(cè)定原理: H2O2與硫酸鈦生成黃色的過(guò)氧化鈦復(fù)合物,在415nm有特征吸收。 需自備的儀器和用品: 可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、丙酮60mL、濃鹽酸10mL、研缽和冰。 |
提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
本試劑盒僅供研究使用公司實(shí)驗(yàn)室提供免費(fèi)代測(cè),7個(gè)工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測(cè)方法 | 貨號(hào) |
過(guò)氧化氫(H2O2)測(cè)試盒可見分光光度法 | 50管/48樣 | 可見分光光度法 | BK-01S6409 |
實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招:
1、定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3、以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照,與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:
① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長(zhǎng)期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。
操作步驟:
1. 樣品的準(zhǔn)備:
a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:收集細(xì)胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測(cè)樣品。
b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動(dòng)物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測(cè)樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒(P1511)測(cè)定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個(gè)活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會(huì)比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測(cè)。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計(jì)的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測(cè)定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測(cè)定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測(cè)定。
2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測(cè)樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。
b. 反應(yīng)啟動(dòng)工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動(dòng)液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動(dòng)液(40X) 加入39μl SOD 檢測(cè)緩沖液的比例進(jìn)行稀釋,即為反應(yīng)啟動(dòng)工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測(cè)中可以各取20微升,參考樣品進(jìn)行檢測(cè)。說(shuō)明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對(duì)于SOD的檢測(cè)并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽(yáng)性對(duì)照或作為對(duì)SOD活性定量的參考。
MLCB寒天培地 MLCB Agar 250g
1g 姬姆色素染料 Giemsa Stain 室溫保存
50T 01和0139CR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
300µL 山羊抗小鼠IgG(H+L),辣根過(guò)氧化物標(biāo)記 Goat Anti-Mouse IgG(H+L),HRP Conjugate -20℃保存
2 ug pBlueScriptR PPP2R1B pBlueScriptR PPP2R1B 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
20只/袋 口腔拭子(醫(yī)用簡(jiǎn)裝)
2 ug pFastBac pFastBac 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
100µL 小鼠抗GFP標(biāo)簽單抗 Anti GFP-Tag Mouse MAb -20℃保存
1瓶 C127細(xì)胞株 C127 低溫運(yùn)輸和保存
顯色培養(yǎng)基
500U E.coli DNA聚合 Ι E.coli DNA Polymerase I -20℃保存
過(guò)氧化氫(H2O2)測(cè)試盒可見分光光度法C9orf86 9號(hào)染色體開放閱讀框86抗體 規(guī)格: 0.2mlD.Aspartic acid D型天冬抗體 規(guī)格: 0.1ml
CCDC147 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白147抗體 規(guī)格: 0.2mlMLX 轉(zhuǎn)化因子樣蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2ml
H Cadherin/CDH13 心臟鈣粘蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlMouse Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml
C11orf21 11號(hào)染色體開放閱讀框21抗體 規(guī)格: 0.2mlRabbit anti-mouse Kappa light chain/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈 規(guī)格: 0.1ml
phospho-PTPN6(Ser591) 磷酸化蛋白酪磷酸1C抗體 規(guī)格: 0.1mlVEGF 管內(nèi)皮生因子抗體 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit anti-Dog IgG whole serum 兔抗狗IgG抗清 規(guī)格: 1mlGADD45 gamma 生抑制DNA損傷基因45γ抗體 GADD45γ 規(guī)格: 0.2ml
phospho-Androgen Receptor(Ser660) 磷酸化雄激素受體抗體 規(guī)格: 0.1mlNFAT4 核因子活化T細(xì)胞胞漿蛋白3抗體 0.2ml
SARM1 SARM1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlTFEB T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子TFEB抗體 規(guī)格: 0.1ml
PLCG 2/PLC gamma 2 磷酯Cγ2抗體 規(guī)格: 0.2mlSM-MHC 心肌肌球蛋白抗體(α-myosin) 規(guī)格: 0.1ml
VWCE VWCE抗體 規(guī)格: 0.2mlGoat Anti-Guinea pig IgG/Gold 膠體金標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.5ml
Rab3A+Rab3B+Rab3C+Rab3D ras基因家族Rab3A--Rab3D抗體 規(guī)格: 0.2mlMitochondrial Pyruvate dehydrogenase kinase 1 丙酮酸脫激1抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-EGFR (Ser1190) 磷酸化表皮生因子受體抗體 規(guī)格: 0.1mlDbx2 大腦發(fā)育同源蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml
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