詳細介紹
本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!
產品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
總抗氧化能力(DPPH法)測試盒微量法 | 100管/96樣 | 微量法 | BK-01S6437 |
商品介紹:
測定意義: 測定對象中各種抗氧化物質和抗氧化酶等構成總抗氧化水平。在生物學、醫(yī)學和藥學研究中常常檢測血漿、血清、唾液、尿液等各種體液,細胞或組織等裂解液、植物或中草藥抽提液及各種抗氧化物(antioxidant)溶液的總抗氧化能力。 測定原理: DPPH為穩(wěn)定的自由基 ,溶于甲醇、乙醇等極性溶劑中,在515nm處有最大吸收。向 DPPH溶液中加入抗氧化劑時,會發(fā)生脫色反應,因此可用吸光度的變化并以Trolox作為對照體系量化抗氧化物質的抗氧化能力。 自備實驗用品: 恒溫水浴鍋、低溫離心機、分光光度計、1mL玻璃比色皿和蒸餾水。 |
試劑組成和配制:
提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
實驗結果判斷我有妙招:
1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:
① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發(fā)生反應的物質要密封,并遠離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。
操作步驟:
1. 樣品的準備:
a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續(xù)檢測。
e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。
2. 試劑盒的準備工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據待檢測樣品(包括標準品) 數量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。
注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。
b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。
c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現稀釋現使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
10uL AP標記的抗抗體 Anti Biotin Ab,AP 4℃保存
2 ug pK18mobSacB pK18mobSacB 低溫運輸,-20℃保存
解磷細菌培養(yǎng)基(有機磷細菌培養(yǎng)基) Phosphate-solubilizing bacteria medium 250g
1瓶 M5076細胞株 M5076 低溫運輸和保存
接觸皿培養(yǎng)基 contacts medium 250g
1瓶 HCT-116細胞株 HCT-116 低溫運輸和保存
100mL TB Solution-IV TB Solution-IV 常溫保存
2次 包涵體大量純化試劑盒 Inclusion Body Maxiprep Kit 常溫保存(需要-20℃保存)
2 ug pSUOER-retro-puro pSUOER-retro-puro 低溫運輸,-20℃保存
100mL 水飽和 Water-Saturated Phenol 常溫避光保存
2 ug pCMV-Tag 5B pCMV-Tag 5B 低溫運輸,-20℃保存
總抗氧化能力(DPPH法)測試盒微量法TMEM161A 跨膜蛋白161A抗體 規(guī)格: 0.2mlG protein beta 4/GNB4 G蛋白β4抗體/核苷酸結合蛋白β亞基4 規(guī)格: 0.2ml
ACTH (1-39) 促上皮質激素(1-39)抗體 0.1mlAngiomotin 管抑素結合蛋白抗體 0.2ml
Integrin Alpha 3 + Beta 1 整合素α3β1抗體(Integrin α3β1) 規(guī)格: 0.2mlGoat Anti-rabbit IgG/RBITC 羅丹明標記的羊抗兔IgG 規(guī)格: 0.3ml
MC3 Receptor 黑素皮質素受體3抗體 規(guī)格: 0.2mlnNos/NOS-1 氮合成-1抗體(神經型) 規(guī)格: 0.1ml
TCHP 抑蛋白TCHP抗體 規(guī)格: 0.2mlRenalase 胺抗體 規(guī)格: 0.2ml
envelope glycoprotein (Yellow fever virus) 黃包膜糖蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-PI3K/PIK3CD(Tyr524) 磷酸化磷脂酰肌醇激催化亞單位D抗體 規(guī)格: 0.1ml
HAS3 透明質酸合成3抗體 規(guī)格: 0.2mlIL-7 白介素7抗體 規(guī)格: 0.1ml
PARD6B 缺陷性分配同源物β抗體 規(guī)格: 0.2mlRabbit Anti-chicken IgM/PE-CY5 PE-CY5標記的兔抗雞IgM 規(guī)格: 0.1ml
MVD 甲羥戊酸脫羧抗體 規(guī)格: 0.1mlSnake poison Protein 蛇毒蛋白抗體(中華眼鏡蛇) 規(guī)格: 0.2ml
ARRDC4 抑制蛋白結構域蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2mlADK/AK 苷酸激抗體 0.1ml
Uricase 尿酸 規(guī)格: 0.1mlCD2 CD2抗體 規(guī)格: 0.1ml
CD63/MLA1 黑色素瘤相關抗原抗體 規(guī)格: 0.1mlMCM5 微小染色體維持缺陷蛋白5抗體 規(guī)格: 0.1ml
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