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簡要描述:超氧陰離子測試盒可見分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:革蘭氏陰性菌增菌液 英文名稱:Gram Negative Bacteria Enrichment Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g 大腸桿菌噬菌體MS2液體培養(yǎng)基 英文名稱:Coliphage MS2 Liquid Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g 大腸桿菌噬菌體MS2半固體培養(yǎng)基 英文名稱:Coliphage MS2 Medium(Semisoli
詳細介紹
特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱:超氧陰離子測試盒可見分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣
檢測方法:可見分光光度法
產(chǎn)品貨號:BK-01S6432
產(chǎn)品分類:氧化與抗氧化系列
商品介紹:
測定意義: 生物體內超氧陰離子等活性氧具有免疫和信號傳導的作用,但積累過多時會對細胞膜及生物大分子產(chǎn)生破壞作用,導致機體細胞和組織代謝異常,從而引起多種疾病。 測定原理: 超氧陰離子與鹽酸羥胺反應生成NO2-,NO2-在對氨基苯磺酸和α-萘胺的作用下,生成紅色的偶氮化合物,在530nm處有特征吸收峰,根據(jù)A530值可以計算樣品中O2-含量。 自備實驗用品及儀器: 天平、水浴鍋、離心機、可見分光光度計/酶標儀、1 mL玻璃比色皿/96孔板、氯仿和蒸餾水。 |
所需的儀器和用品:
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗
樣本和試劑浪費!
1、樣本制備
① 組織樣本: 取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。 【注】:若增加樣本量,可按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進行提取
| ② 細菌/細胞樣本: 先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次); 12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。 【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數(shù)量(10 4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。 |
實驗方法學:
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔5~10分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
10次 百萬堿基級動物DNAout
2 ug pECFP-MEM pECFP-MEM 低溫運輸,-20℃保存
改良鹽緩沖液PSB Phosphate Saline Buffer,Modified 250g
100g 可溶性淀粉 Starch Soluble 室溫干燥保存
50T 玉米BT11/MS PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存
100mL Percoll 2.0
125mL HEPES Lysis Buffer with Triton,2X HEPES Lysis Buffer with Triton,2X 常溫保存
0.3mL 可逆型Taq DNA聚合抑制劑 Taq DNA Polymerase Inhibitor -20℃保存
2 ug pLNCX2 pLNCX2 低溫運輸,-20℃保存
Slanetz和Bartley培養(yǎng)基 Slanetz And Bartley Medium 250g
1瓶 NAMALWA細胞株 NAMALWA 低溫運輸和保存
超氧陰離子測試盒可見分光光度法Phospho-Mst1(Thr183) 磷酸化蛋白激MST1抗體 規(guī)格: 0.1ml
PLEKHM1 石骨癥相關蛋白PLEKHM1抗體 規(guī)格: 0.2ml
Annexin A1 膜粘連蛋白A1抗體 規(guī)格: 0.1ml
mTOR/FRAP 雷帕霉素靶蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
C12ORF54 12號染色體開放閱讀框54抗體 規(guī)格: 0.2ml
ZNF217 鋅指脂蛋白217抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-PIK3C3(Ser282) 磷酸化磷脂酰肌醇激3催化亞單位3抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-ITGB3(Tyr785) 磷酸化整合素β3抗體 規(guī)格: 0.1ml
CANX/Calnexin 鈣連蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-dog IgG/Gold 膠體金標記的兔抗狗IgG 規(guī)格: 0.5ml
BIRC5/Survivin variant 細胞凋亡抑制因子5抗體 規(guī)格: 0.2ml
C5orf35 5號染色體開放閱讀框35抗體 規(guī)格: 0.2ml
注意事項:
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?
對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應時間不夠,可以延長反應時間(反應時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質的影響太大,為了降低雜質的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通??梢允箿y定正常。計算公式中乘以相應稀釋倍數(shù)。
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