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非蛋白質(zhì)巰基測試盒可見分光光度法

簡要描述:非蛋白質(zhì)巰基測試盒可見分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:EF-18瓊脂 英文名稱:EF-18 Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g RVS肉湯 英文名稱:RVS Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g MKTTn肉湯(ISO) 英文名稱:MKTTn Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g 賴鐵瓊脂(LIA) 英文名稱:Lysine Iron Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g

  • 產(chǎn)品型號:
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時間:2023-12-28
  • 訪  問  量:437

詳細(xì)介紹

商品介紹:

測定意義:

生物體內(nèi)巰基主要包括非蛋白質(zhì)巰基和蛋白質(zhì)巰基。巰基化合物在體內(nèi)具有重要的解毒功能,對生物體的自我調(diào)節(jié)具有非常重要的生理意義。

測定原理:

巰基基團(tuán)與5,5’- 二硫代--硝基苯甲酸(DTNB)反應(yīng),生成黃色化合物,在412nm處有最大吸收峰。

自備實驗用品:

天平、研缽、可見分光光度計、恒溫水浴鍋、1mL玻璃比色皿和蒸餾水,甲醇。

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費(fèi)代測,7個工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

檢測方法

貨號

非蛋白質(zhì)巰基測試盒可見分光光度法

50管/24樣

可見分光光度法

BK-01S6463

11.png 

實驗結(jié)果判斷我有妙招:

1、定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。

3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:

① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。

操作步驟:

1. 樣品的準(zhǔn)備:

a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:收集細(xì)胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。

e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測定。

2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。

b. 反應(yīng)啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進(jìn)行稀釋,即為反應(yīng)啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進(jìn)行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

1瓶 786-O細(xì)胞株 786-O 低溫運(yùn)輸和保存

1個 0.5mLDNA超濾離心管(90-150KD)  

2 ug pCMV5-HA pCMV5-HA 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

250mL MOPS Buffer,1.0M,pH7.4   MOPS Buffer,1.0M,pH7.4   常溫保存

100次 植物種屬鑒定PCR Mix 7(質(zhì)體 rpoB) Plant DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存

2 ug pMAL-p4x pMAL-p4x 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

葡萄糖酸鹽  20支

1瓶 RH-35細(xì)胞株 RH-35 低溫運(yùn)輸和保存

Todd-Hewitt瓊脂 Todd-Hewitt Agar 250g

50mg β-D- 阿糖胞苷 Cytosine β-D-Arabinofuranoside 4℃保存

50T 腸道病毒EV71/柯薩奇病毒A16型2聯(lián)PCR檢測試劑盒  低溫運(yùn)輸,-20℃保存

非蛋白質(zhì)巰基測試盒可見分光光度法Drebrin  腦發(fā)育調(diào)節(jié)蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

CEA/CD66e/CEACAM5  胚抗原抗體 規(guī)格: 0.1ml

DP-II  橋粒斑蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml

C CBL  原基因CBL2抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-Biotin/AP  堿性磷酸(AP)標(biāo)記的兔抗抗體IgG 規(guī)格: 0.1ml

BMP8  骨形態(tài)發(fā)生蛋白8抗體 規(guī)格: 0.1ml

Annexin I  膜粘連蛋白 I抗體 規(guī)格: 0.1ml

Nephrin  小球細(xì)胞粘附分子受體抗體 規(guī)格: 0.1ml

ABI2  瘤抑制基因ABI2/酪蛋白激結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

TFF1/BCEI  雌激素誘導(dǎo)蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

phospho-Arhgef2(Ser810)  磷酸化Rho鳥苷酸交換因子2抗體 規(guī)格: 0.1ml

FSH/FSHB  促卵泡刺激素抗體 規(guī)格: 0.1ml

 


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