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查爾酮異構酶(CHI)測試盒可見分光光度法

簡要描述:查爾酮異構酶(CHI)測試盒可見分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:營養(yǎng)V-B培養(yǎng)基(底層) 英文名稱:minimum Nutritional V-B Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g 粘液酸鹽測試肉湯 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:1ml*20支 粘液酸鹽質(zhì)控肉湯 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:1ml*20支 煌綠肉湯增菌液基礎 英文名稱:Brilliant Green Enrichment Broth Base 產(chǎn)

  • 產(chǎn)品型號:
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時間:2023-12-28
  • 訪  問  量:612

詳細介紹

商品介紹:

測定意義:

查爾酮異構酶(Chalcone isomerase, CHI)是個被認識的黃酮類化合物合成相關酶,也是黃酮代謝途徑中的關鍵酶之一。查爾酮異構酶和查爾酮合酶一起構成了黃酮類化合物生物合成的限速酶。

測定原理:

查爾酮異構酶(CHI)催化查爾酮環(huán)化形成 4,5,7-三羥基黃烷酮,通過測定381nm下的吸光度變化表示CHI的活性。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

檢測方法

貨號

查爾酮異構酶(CHI)測試盒可見分光光度法

50管/48樣

可見分光光度法

BK-01S6469

11.png 

實驗結(jié)果判斷我有妙招:

1、定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。

3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:

① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發(fā)生反應的物質(zhì)要密封,并遠離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應的物質(zhì)要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。

操作步驟:

1. 樣品的準備:

a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。

e. 根據(jù)蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。

2. 試劑盒的準備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標準品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。

b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

10mL ONPG溶液,10mg/mL O-Nitrophenyl-β-D-Galactopyranoside -20℃干燥避光保存

100mL Kinase Buffer IV,5X Kinase Buffer IV,5X 常溫保存

5ug Oligo dT12-18引物 Oligo dT12-18 Primer -20℃保存

2 ug pLVPTH2-tTR-KRAB-Cerulean-non_shRNA_control (2041 ng) pLVPTH2-tTR-KRAB-Cerulean-non_shRNA_control (2041 ng) 低溫運輸,-20℃保存

FWA淡水魚類瓊脂培養(yǎng)基  250g

1瓶 NCTC 1469 [NCTC1469]細胞株 NCTC 1469 [NCTC1469] 低溫運輸和保存

阪崎腸桿菌分離瓊脂(ESIATM) Enterobacter Sakazakii Isolation Agar 250g

5g N,N- 雙 (2-  )-3- 氨基乙磺酸 BES 室溫避光保存

500mL Tris-HCl Buffer,1.0M,pH8.8   Tris-HCl Buffer,1.0M,pH8.8   常溫保存

2×0.5mL 蛋白抑制劑混合液 Protease Inhibitor Cocktail -20℃保存

2 ug pTRV1 pTRV1 低溫運輸,-20℃保存

查爾酮異構酶(CHI)測試盒可見分光光度法ECM1  細胞外基質(zhì)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml

GTPBP4/CRFG  GTP結(jié)合蛋白4抗體(慢性功能衰竭蛋白) 規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-Bovine IgM/PE-Cy3  PE-Cy3標記的兔抗牛IgM 規(guī)格: 0.1ml

RNF148  環(huán)指蛋白148抗體 規(guī)格: 0.2ml

IFNAR1  干擾素α受體抗體 規(guī)格: 0.1ml

NESG1/CCDC19  鼻咽上皮細胞特異性蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml

E1 glycoprotein  毒糖蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

P-CK/Cytokeratin AE1 + AE3  廣譜細胞角蛋白PCK抗體 規(guī)格: 0.1ml

Donkey Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標記的驢抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml

FBXO31  F-box蛋白家族FBXO31抗體 規(guī)格: 0.2ml

CETP  酯轉(zhuǎn)移蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

CPB2/Carboxypeptidase B2  胰羧肽B2抗體 規(guī)格: 0.2ml

 


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