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簡要描述:Ca++Mg++ ——ATP酶測試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:厭氧菌瓊脂 英文名稱:Anaerobic Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g CDC厭氧菌瓊脂 英文名稱:CDC Anaerobic Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g 50%卵黃乳液 英文名稱:50% egg Yolk emulsion 產(chǎn)品規(guī)格:5ml*10 磺胺鈉溶液(12mg) 英文名稱:Sodium sulfadiazine 產(chǎn)品規(guī)格:1
詳細介紹
本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
Ca++Mg++ ——ATP酶測試盒微量法 | 100管/48樣 | 微量法 | BK-01S6555 |
商品介紹:
測定意義: Ca++ Mg++-ATP酶廣泛分布于植物、動物、微生物和細胞中,可催化ATP水解生成ADP和無機磷。 測定原理: 根據(jù)Ca++ Mg++-ATP酶分解ATP生成ADP及無機磷,通過測定無機磷的量來確定ATP酶活性高低。 需自備的儀器和用品: 可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。 |
試劑組成和配制:
提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
實驗結(jié)果判斷我有妙招:
1、定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:
① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。
操作步驟:
1. 樣品的準備:
a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。
2. 試劑盒的準備工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標準品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。
b. 反應(yīng)啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應(yīng)啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
100mL 非凍型拭子病毒保存液 Virus-LOCKER 4℃保存
2 ug pcDNA3.1/V5-His C pcDNA3.1/V5-His C 低溫運輸,-20℃保存
30%葡萄糖溶液(PH6.5±0.5) 30% Dextrose Broth 250g
10g 次(亞)甲基蘭 Methylene Blue 室溫干燥保存
假單胞cfc選擇性培養(yǎng)基 Pseudomonas CFC Selective Agar 250g
100 mg Calcein M Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存
250mL Blocking Reagent with Triton X-100 & Sheep Serum Blocking Reagent with Triton X-100 & Sheep Serum 常溫保存
0.1mL 微量DNA助沉劑 DNADOWN -20℃保存
2 ug pGL4.13[luc2/SV40] pGL4.13[luc2/SV40] 低溫運輸,-20℃保存
堿性膽鹽瓊脂 250g
1瓶 HCC827細胞株 HCC827 低溫運輸和保存
Ca++Mg++ ——ATP酶測試盒微量法O-GlcNAc transferase O位N-乙酰葡萄糖胺OGT抗體 規(guī)格: 0.2ml
KLK3/Prostate Specific Antigen 激肽釋放3/舒管素3抗體 0.2ml
Mouse Anti-rat IgG/Bio 標記的小鼠抗大鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml
PDE4D 磷酸二酯4D抗體 規(guī)格: 0.1ml
CCDC102B 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白102B抗體 規(guī)格: 0.2ml
Phospho-LRP6(Thr1479) 磷酸化脂蛋白受體相關(guān)蛋白6抗體 規(guī)格: 0.1ml
CHMP1B 染色質(zhì)修飾蛋白1B抗體 規(guī)格: 0.2ml
SAPK3/MAPK12 應(yīng)激活化蛋白激3抗體(絲裂原活化蛋白激12) 規(guī)格: 0.2ml
PGC1 beta 過氧化物體增物激活受體γ輔激活子1β抗體 規(guī)格: 0.2ml
AMP deaminase 1 苷單磷酸脫氨1抗體 0.2ml
CA IX 碳酸酐9抗體 規(guī)格: 0.1ml
OAT-1/SLC22A6 陰離子轉(zhuǎn)運蛋白-1抗體 規(guī)格: 0.1ml
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