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簡(jiǎn)要描述:檸檬酸(CA)含量測(cè)試盒可見分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:MC培養(yǎng)基 英文名稱:Chalmers Agar,Modified 產(chǎn)品規(guī)格:250g BLB瓊脂 英文名稱:BLB agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g MRS瓊脂 英文名稱:MRS Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g LBS瓊脂 英文名稱:LBS agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g
詳細(xì)介紹
特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱:檸檬酸(CA)含量測(cè)試盒可見分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣
檢測(cè)方法:可見分光光度法
產(chǎn)品貨號(hào):BK-01S6574
產(chǎn)品分類:三羧酸循環(huán)系列
商品介紹:
測(cè)定意義: CA又稱枸櫞酸,廣泛存在于各種生物胞質(zhì)中,是生物體內(nèi)重要的有機(jī)酸。CA也存在于線粒體基質(zhì)中,是三羧酸循環(huán)步反應(yīng)的產(chǎn)物,與脂肪、蛋白質(zhì)和糖最終轉(zhuǎn)化為二氧化碳密切相關(guān)。 測(cè)定原理 酸性條件下,檸檬酸可將Cr6+還原成Cr3+,在545nm處有特征吸收峰;通過測(cè)定545nm吸光值的增加,即可計(jì)算出樣品中檸檬酸含量。 實(shí)驗(yàn)中所需儀器及設(shè)備 可見分光光度計(jì)、低溫離心機(jī)、掌上離心機(jī)、可調(diào)式移液槍、1ml玻璃比色皿、雙蒸水 |
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本: 取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。 【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
| ② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本: 先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次); 12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。 【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10 4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。 |
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
0.1mL×10 0化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞 0 Competent Cell -80℃保存
2 ug pNTAP- B pNTAP- B 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
MS培養(yǎng)基(不含瓊脂和蔗糖) 250g
2 ug pLVX-IRES-ZsGreen1 pLVX-IRES-ZsGreen1 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
XLT4瓊脂 XLT4 Agar 250g
10mL 弗氏*佐劑 Freund Adjuvant Complete 4℃保存
50T 古典豬瘟病毒PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
200mL HRP 穩(wěn)定劑/ 稀釋劑 HRP Stablizing Solution -20℃保存
2 ug YEP365 YEP365 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
10g 酸洗玻璃珠(直徑:800μm) 常溫
2 ug pAcHLT-B pAcHLT-B 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
檸檬酸(CA)含量測(cè)試盒可見分光光度法Securin/PTTG 垂體瘤轉(zhuǎn)化基因抗體 規(guī)格: 0.1mlALR 肝再生增強(qiáng)因子抗體 規(guī)格: 0.1ml
BMP10 骨形態(tài)發(fā)生蛋白10抗體 規(guī)格: 0.2mlIGFBP9/CCN3 胰島素樣生因子結(jié)合蛋白9 規(guī)格: 0.1ml
Smad2 細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-2抗體 規(guī)格: 0.1mlPOT1 端粒保護(hù)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml
MTTP 微粒體甘油三酯轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白 規(guī)格: 0.2mlAnnexin A8 膜粘連蛋白8抗體 規(guī)格: 0.1ml
PCDHA3 原鈣粘附蛋白α3抗體 規(guī)格: 0.2mlMouse Anti-human IgG/HRP 辣根過氧化物標(biāo)記的小鼠抗人IgG 規(guī)格: 0.1ml
DEPTOR/DEPDC6 DEPTOR蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlRb/P105 RB 成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤基因抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-EphB1/Eph receptor B1(Tyr317) 磷酸化酪蛋白激受體B1抗體 規(guī)格: 0.1mlDHRS7 視網(wǎng)膜短鏈脫/還原家族7抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-Mink IgG/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的兔抗水貂IgG 規(guī)格: 0.1mlGMCL1L 生細(xì)胞樣蛋白1樣蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
Phospho-CEBP beta (Ser105) 磷酸化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP β抗體 規(guī)格: 0.1mlC12ORF68 12號(hào)染色體開放閱讀框68抗體 規(guī)格: 0.2ml
C4orf42 4號(hào)染色體開放閱讀框42抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-SirT1 (Ser27) 磷酸化沉默調(diào)節(jié)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml
IDE 胰島素降解抗體 規(guī)格: 0.2mlIL-29/IFNL1 白細(xì)胞介素29抗體 規(guī)格: 0.2ml
TRAP/Tartrate Resistant Acid Phosphatase 端粒調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
注意事項(xiàng):
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。
2、對(duì)照管只需要做一管。
3、若對(duì)照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?
對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間30min可以延長(zhǎng)到40min)。對(duì)照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測(cè),通??梢允箿y(cè)定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
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