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簡要描述:葡萄糖6磷酸(6PG)測試盒可見分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:麥康凱液體培養(yǎng)基(2015藥典) 英文名稱:MaConkey Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g 木糖賴脫氧膽酸鹽瓊脂培養(yǎng)基(2015藥典) 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:250g 腸道菌增菌液體培養(yǎng)基(顆粒)(2015藥典) 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:250g RV沙門菌增菌液體培養(yǎng)基(2015藥典)(顆粒) 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:250g
詳細介紹
實驗方法學:
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔5~10分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱:葡萄糖6磷酸(6PG)測試盒可見分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/24樣
檢測方法:可見分光光度法
產(chǎn)品貨號:BK-01S6622
產(chǎn)品分類:糖酵解系列
商品介紹:
測定意義: 6PG (Glucose-6-phosphate,葡萄糖-6-磷酸,又稱6-磷酸葡萄糖),是糖酵解和磷酸戊糖途徑的中間產(chǎn)物,廣泛存在于動植物體和微生物中。在糖酵解的步反應中,葡萄糖被己糖激酶催化生成葡萄糖-6-磷酸,然后通過磷酸葡萄糖異構酶的催化形成果糖-6-磷酸,以繼續(xù)糖酵解的其它步驟;而在戊糖磷酸途徑中,葡萄糖-6-磷酸是其個底物,該過程也是生成NADPH的主要途徑。此外,葡萄糖-6-磷酸也能轉化形成糖原或淀粉而被儲存起來。 測定原理: 6-磷酸葡萄糖脫氫酶可催化6PG和NADP+生成6磷酸葡萄糖酸和NADPH,NADPH在1-mPMS的作用下使WST-8顯橙黃色,在450 nm下測定吸光值。 需自備的儀器和用品: 分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰、蒸餾水。 |
所需的儀器和用品:
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗
樣本和試劑浪費!
1、樣本制備
① 組織樣本: 取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。 【注】:若增加樣本量,可按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進行提取
| ② 細菌/細胞樣本: 先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次); 12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。 【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數(shù)量(10 4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。 |
注意事項:
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?
對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應時間不夠,可以延長反應時間(反應時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質的影響太大,為了降低雜質的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通??梢允箿y定正常。計算公式中乘以相應稀釋倍數(shù)。
梭菌強化培養(yǎng)基 Reinforced medium for clostridia 250g
30µg 人培養(yǎng)細胞基因組DNA Human Culture Cell Genomic DNA 4℃保存
250mL MES Buffer,1.0M,pH9.0 MES Buffer,1.0M,pH9.0 常溫保存
100次 植物種屬鑒定PCR Mix 9(質體 trnH-psbA) Plant DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存
2 ug pMAL-p5X pMAL-p5X 低溫運輸,-20℃保存
AHM鑒別培養(yǎng)基 AHM Medium 250g
1瓶 RKO-E6細胞株 RKO-E6 低溫運輸和保存
革蘭氏陽性菌增菌液 Gram Positive Bacteria Enrichment Broth 250g
1g 3,3’- 二氨基聯(lián)苯胺四鹽酸 DAB HCl -20℃保存
Elek氏培養(yǎng)基 Elek Medium 250g
30次 一站式CTAB-PAGE電泳套裝
葡萄糖6磷酸(6PG)測試盒可見分光光度法CD10/MME/Neprilysin 金屬肽鏈內切抗體 規(guī)格: 0.1ml
HBsAg(H2F4) 人表面抗原單克隆抗體(檢測) 規(guī)格: 0.1ml
ZAP-70 zeta相關蛋白70抗體 規(guī)格: 0.1ml
TSPAN10/Oculospanin 四分子交聯(lián)體10抗體(四旋蛋白) 規(guī)格: 0.2ml
Phospho-PKC gamma (Thr674) 磷酸化蛋白激C亞型G抗體 規(guī)格: 0.1ml
EFHC1 EFHC1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
TReP132/RAPA 抗雌激素抵抗蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml
Ku-80 DNA修復Ku-80抗體 規(guī)格: 0.1ml
PHAPI2/APRIL 酸性核磷蛋白32家族B抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-ERK1/MAPK-1/2(Thr183/185) 磷酸化絲裂原活化蛋白激1/2抗體 規(guī)格: 0.1ml
SV2A 突觸泡蛋白2A抗體 規(guī)格: 0.2ml
TEF3/TEAD4 轉錄增強因子TEF3抗體 規(guī)格: 0.2ml
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