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脂肪酶(LPS)測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法

簡(jiǎn)要描述:脂肪酶(LPS)測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:抗生素檢定培養(yǎng)基 32 號(hào) 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:250g 支原體培養(yǎng)基基礎(chǔ)(含精) 英文名稱:Mycoplasma Broth Base 產(chǎn)品規(guī)格:250g PPLO肉湯 英文名稱:PPLO Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g 支原體肉湯培養(yǎng)基 英文名稱:Mycoplasma Broth Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g

  • 產(chǎn)品型號(hào):
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時(shí)間:2023-12-26
  • 訪  問(wèn)  量:635

詳細(xì)介紹

實(shí)驗(yàn)方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點(diǎn):

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測(cè)定。

特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。

產(chǎn)品名稱:脂肪酶(LPS)測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法

產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣

檢測(cè)方法:可見(jiàn)分光光度法

產(chǎn)品貨號(hào):BK-01S6640

產(chǎn)品分類:脂肪酸代謝系列
商品介紹:

測(cè)定意義:

LPS又稱甘油酯水解酶,催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油(或者甘油二酯和單酯)。LPS廣泛的存在于各種生物中。對(duì)于人來(lái)說(shuō),主要是胰脂肪酶,分解食物中脂肪形成單酰甘油和游離脂肪酸,被人體吸收并重新合成脂肪。外源性脂質(zhì)攝入過(guò)多是引發(fā)肥胖的重要原因,血清中LPS的異常增高常見(jiàn)于胰腺炎和胰腺癌。

測(cè)定原理

LPS催化油酯水解成脂肪酸,利用銅皂法測(cè)定脂肪酸生成速率,即可計(jì)算LPS活性。

實(shí)驗(yàn)中所需儀器和用品

甲苯、無(wú)水乙醇、研缽、冰、臺(tái)式離心機(jī)、震蕩混勻器、可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍和雙蒸水。

所需的儀器和用品:

可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:

建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)

樣本和試劑浪費(fèi)!

1、樣本制備

組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行

勻漿(或使用各類常見(jiàn)勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進(jìn)行提取

 

細(xì)菌/細(xì)胞樣本:

先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。

【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10

4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進(jìn)行提取。 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。

QQ截圖20220307153537.png 

注意事項(xiàng):

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。

2、對(duì)照管只需要做一管。

3、若對(duì)照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?

對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過(guò)低可能是(1)試劑二或試劑四沒(méi)有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒(méi)有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間30min可以延長(zhǎng)到40min)。對(duì)照管吸光值過(guò)高可能是試劑二未按操作說(shuō)明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測(cè),通??梢允箿y(cè)定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基管  20ml*10支

5g 天狼猩紅 Sirius Rosa BB 室溫保存

50T 鴨肝炎病毒PCR檢測(cè)試劑盒   低溫運(yùn)輸,-20℃保存

200 mL 人 NK 細(xì)胞分離液1.062 Cell Separation Solution -20℃保存

100mL HEPES Buffer,0.5M,pH7.6  HEPES Buffer,0.5M,pH7.6  常溫保存

5mL dNTP溶液,10 mM dNTP Solution,10 mM -20℃保存

2 ug pLP VSV-G pLP VSV-G 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

十六烷基瓊脂 Cetrimide Agar 250g

1瓶 MKN-28細(xì)胞株 MKN-28 低溫運(yùn)輸和保存

Korser氏枸椽酸鹽肉湯 Korser Citrate Sodium Broth 100g

100g 瓊脂糖 Agarose 4℃保存

脂肪酶(LPS)測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法Trypsin Inhibitor/CRISP8  胰蛋白抑制劑抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-SEK1/MKK4 (Thr261)  磷酸化絲裂原活化蛋白激激4抗體 規(guī)格: 0.1ml

Goat Anti-rabbit IgG/HRP  辣根過(guò)氧化物標(biāo)記的羊抗兔IgG 規(guī)格: 0.1mlphospho-CTNNBIP1 (Thr43/Ser50)  磷酸化β鏈接素相互作用蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml

RASSF2  Ras相關(guān)結(jié)構(gòu)域蛋白質(zhì)2抗體 規(guī)格: 0.2mlPLAG1  多型性瘤基因1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

C1orf187  1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框187抗體 規(guī)格: 0.2mlCD45/B220  白細(xì)胞共同抗原抗體 規(guī)格: 0.1ml

KIZUNA/C20orf19  20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框19抗體 規(guī)格: 0.2mlCD36/PAS-4  CD36抗體 規(guī)格: 0.1ml

PSAP/PAP  前列酸性磷酸抗體 規(guī)格: 0.1mlEAAT3  膠質(zhì)細(xì)胞谷運(yùn)載蛋白3抗體(神經(jīng)/上皮細(xì)胞谷運(yùn)載蛋白) 規(guī)格: 0.1ml

UEVLD/UEV3  泛素結(jié)合E2樣蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlSLC27A2/ACSVL1  鏈脂肪酸輔A連接抗體 規(guī)格: 0.2ml

FANCD2  FANCD2抗體 規(guī)格: 0.1mlNucleoprotein TPR  核蛋白易位啟動(dòng)子區(qū)域TPR抗體 規(guī)格: 0.2ml

CD22/BLCAM  B淋巴細(xì)胞粘附分子CD22抗體 規(guī)格: 0.1mlC13orf38/LOC728591  13號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框38抗體 規(guī)格: 0.2ml

Phospho-p63 (Ser455)  磷酸化P63瘤抑制基因抗體 規(guī)格: 0.1mlPKC alpha  蛋白激C α抗體 規(guī)格: 0.2ml

GLP-1R  樣肽-1受體抗體 規(guī)格: 0.1mlFLIP/c FLIP  凋亡調(diào)節(jié)基因之一抗體 規(guī)格: 0.1ml

phospho-DAG1 (Tyr892)  磷酸化肌萎相關(guān)蛋白DAG1抗體 規(guī)格: 0.1ml 

 


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