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淀粉脫分支酶(DBE)測(cè)試盒可見分光光度法

簡(jiǎn)要描述:淀粉脫分支酶(DBE)測(cè)試盒可見分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:硝酸鹽蛋白胨水培養(yǎng)基 英文名稱:Nitrate peptone water medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g Slanetz和Bartley培養(yǎng)基 英文名稱:Slanetz And Bartley Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g B(4ug) 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:1ml/支*5 硫酸新(100ug) 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:1ml/支

  • 產(chǎn)品型號(hào):
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時(shí)間:2023-12-26
  • 訪  問  量:624

詳細(xì)介紹

特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。

產(chǎn)品名稱:淀粉脫分支酶(DBE)測(cè)試盒可見分光光度法

產(chǎn)品規(guī)格:50管/24樣

檢測(cè)方法:可見分光光度法

產(chǎn)品貨號(hào):BK-01S6692

產(chǎn)品分類:淀粉系列
商品介紹:

測(cè)定意義:

DBE能夠?qū)R恍缘亓呀庵ф湹矸鄣?/span>α-1,6糖苷鍵,產(chǎn)生線性的葡萄糖鏈,在調(diào)整支鏈淀粉分子的鏈長(zhǎng)方面有重要的作用。

測(cè)定原理

采用3,5-二硝基水楊酸法測(cè)定DBE催化支鏈淀粉產(chǎn)生的還原糖,通過測(cè)定還原糖含量的變化來計(jì)算DBE活性。

需自備的的儀器和用品

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰、蒸餾水

所需的儀器和用品:

可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:

建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)

樣本和試劑浪費(fèi)!

1、樣本制備

組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進(jìn)行提取

 

細(xì)菌/細(xì)胞樣本:

先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。

【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10

4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進(jìn)行提取。 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。

QQ截圖20220307153537.png 

實(shí)驗(yàn)方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點(diǎn):

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測(cè)定。

100g 十二烷基 SDS(Sodium Dodecylsulfate)  室溫密封陰涼干燥保存

50T 微生物致病菌PCR快速檢測(cè)系列  低溫運(yùn)輸,-20℃保存

10次 一站式檢測(cè)TUNEL試劑盒(DAB法) One-Stop Biotin-Based TUNEL Kit -20℃保存

氯化鈉瓊脂培養(yǎng)基 Mannitol Salt Agar Medium 250g

100µg 葡激 Staphylokinase -20℃保存

250mL SDS Solution(SDS溶液),10%  SDS Solution,10%  常溫保存

1 管 OrgamiB(DE3)大腸桿菌 Origami B(DE3) E.coli Strain -80℃保存

2 ug pRS41H pRS41H 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

250次 液體樣品RNAout Liquid Sample RNAOUT 4℃保存

2 ug pcDNA4/TO/Myc-His C pcDNA4/TO/Myc-His C 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA) Potato Dextrose Agar 250g

淀粉脫分支酶(DBE)測(cè)試盒可見分光光度法VEGFR3  管內(nèi)皮細(xì)胞生因子受體3抗體 規(guī)格: 0.1mlFGF10  成纖維細(xì)胞生因子10抗體 規(guī)格: 0.1ml

MMRN1/ECM  內(nèi)皮細(xì)胞MMRN1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlRabbit Anti-human IgG/FITC  FITC標(biāo)記的兔抗人IgG 規(guī)格: 0.3ml

VANGL1/LPP2  瘤抑制基因LPP2抗體 規(guī)格: 0.2mlPCDHA5  原鈣粘附蛋白α5抗體 規(guī)格: 0.2ml

Phospho-PDGFRA(Tyr988)  磷酸化小板源性生因子受體α 規(guī)格: 0.1mlp73 alpha  p53相關(guān)蛋白P73α抗體 規(guī)格: 0.2ml

cGMP  環(huán)磷酸鳥苷抗體 規(guī)格: 0.2mlLipophilin B  親脂性蛋白B抗體 規(guī)格: 0.2ml

ACBD6  ?;oA結(jié)合結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體 規(guī)格: 0.2mlC21orf87  21號(hào)染色體開放閱讀框87抗體 規(guī)格: 0.2ml

Mouse Anti-Bov IgG/Cy5  Cy5標(biāo)記的小鼠抗牛IgG 規(guī)格: 0.1mlANGPT3/ANG3/ANGPT4/ANG4  管生成素3/管生成素4抗體 規(guī)格: 0.1ml

FMDV Polyprotein (VPg2 protein)  口蹄疫毒A型抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-MEF2C(Ser396)  磷酸化肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2C抗體 規(guī)格: 0.1ml

PRKAG2/AMPKγ2  苷單磷酸活化蛋白激γ2抗體 規(guī)格: 0.2mlEphB1+EphB2  酪蛋白激受體B1+B2抗體 規(guī)格: 0.2ml

SIRT1/sirtuin 1  沉默調(diào)節(jié)蛋白1抗體 0.1mlphospho-GATA-4(ser 262)  磷酸化GATA結(jié)合蛋白4抗體 規(guī)格: 0.1ml

Phospho-MAP2(Ser136)  磷酸化微管相關(guān)蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1mlSLC25A20  線粒體二羧酸載體蛋白20抗體 0.1ml

C22orf31  22號(hào)染色體開放閱讀框31抗體 規(guī)格: 0.2mlASTE1  ASTE1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml 

注意事項(xiàng):

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。

2、對(duì)照管只需要做一管。

3、若對(duì)照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?

對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間30min可以延長(zhǎng)到40min)。對(duì)照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測(cè),通常可以使測(cè)定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

 


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