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簡要描述:海藻糖6磷酸酯酶(TPP)測試盒可見分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:牛心浸粉 英文名稱:Beef Heart Infusion 產(chǎn)品規(guī)格:100g 肝浸粉 英文名稱:Liver Infusion 產(chǎn)品規(guī)格:100g 牛膽鹽 英文名稱:Bile Salt 產(chǎn)品規(guī)格:100g 酸水解酪蛋白 英文名稱:Casein acid Hydrolysate 產(chǎn)品規(guī)格:250g
詳細(xì)介紹
注意事項(xiàng):
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。
2、對(duì)照管只需要做一管。
3、若對(duì)照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?
對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間30min可以延長到40min)。對(duì)照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通??梢允箿y定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱:海藻糖6磷酸酯酶(TPP)測試盒可見分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/24樣
檢測方法:可見分光光度法
產(chǎn)品貨號(hào):BK-01S6724
產(chǎn)品分類:海藻糖系列
商品介紹:
測定意義: 海藻糖是功能性低聚糖,具有非還原性、保濕性、熱酸穩(wěn)定性、抗凍結(jié)性等特性,是細(xì)胞在不良環(huán)境條件下產(chǎn)生的一種重要的抗逆應(yīng)激物之一,它對(duì)生物大分子和生物體組織有著非特異性的保護(hù)作用。海藻糖合成酶(Trehalose Synthase)催化麥芽糖合成海藻糖,是海藻糖生物合成的關(guān)鍵途徑之一。 測定原理: TS催化麥芽糖產(chǎn)生海藻糖,使用糖化酶分解剩余麥芽糖為葡萄糖,通過葡萄糖氧化酶法測定葡萄糖含量,按照麥芽糖減少的量表示海藻糖合酶活性。 需自備的儀器和用品: 分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本: 取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。 【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
| ② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本: 先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次); 12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。 【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10 4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。 |
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
5g 亮綠 Brilliant Green 室溫保存
500mL Tris-Tricine-SDS Buffer,10X Tris-Tricine-SDS Buffer,10X 常溫保存
25Inh.U α2巨球蛋白 α2-Macroglobulin -20℃保存
2 ug pTYB 1 pTYB 1 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
50次 柱式凍存血液DNAout Column Frozen Blood DNAOUT 常溫
2 ug psiSTRIKE psiSTRIKE 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
BL瓊脂培養(yǎng)基 BL Agar Medium 250g
1000U Thrombin From Bovine Plasma -20℃保存
50T 致病性大腸桿菌PCR檢測試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
10mg Hoechst 33258干粉 Hoechst 33258 Powder -20℃干燥避光保存
100mL Imidazole Buffer(咪唑緩沖液),0.5M,pH6.5 Imidazole Buffer,0.5M,pH6.5 常溫保存
海藻糖6磷酸酯酶(TPP)測試盒可見分光光度法Insulin 胰島素抗體 規(guī)格: 0.1ml
CSNK1G2 酪蛋白激1γ2抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-Bovine IgM/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗牛IgM 規(guī)格: 2ml
Hsp93 熱休克蛋白93抗體 規(guī)格: 0.2ml
Mouse Anti-human IgM/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的小鼠抗人IgM 規(guī)格: 0.1ml
SCN1A SCN1A抗體 規(guī)格: 0.1ml
Goat Anti-Mouse IgG/PE PE標(biāo)記的羊抗小鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml
NDUFA1 NADH氧化還原輔1抗體 規(guī)格: 0.2ml
AMACR/P504S α-甲基?;oA消旋抗體 規(guī)格: 0.1ml
AMPK beta 1 苷單磷酸活化蛋白激β1抗體 規(guī)格: 0.1ml
HBAB/AKR1C2 膽汁酸結(jié)合蛋白DDH2抗體 規(guī)格: 0.2ml
FGF14 成纖維細(xì)胞生因子14抗體 規(guī)格: 0.2ml
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