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簡要描述:葡萄糖脫氫酶(GCDH)測試盒紫外分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:10%NaCl胰胨水 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:20支 3%NaCl乳糖 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:20支 3%NaCl阿拉伯糖 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:20支 3%NaCl胰胨水 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:20支
詳細(xì)介紹
注意事項(xiàng):
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?
對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通??梢允箿y定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱:葡萄糖脫氫酶(GCDH)測試盒紫外分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣
檢測方法:紫外分光光度法
產(chǎn)品貨號:BK-01S6766
產(chǎn)品分類:糖代謝系列
商品介紹:
測定意義: GCDH(EC 1.1.1.47)催化D-葡萄糖和NAD(P)生成D-葡萄糖酸和NAD(P)H,大量存在于高等動(dòng)物的肝臟和弱氧化醋桿菌中。在低聚果糖生產(chǎn)中使用GCDH,不僅能去除低聚果糖中的葡萄糖提高低聚果糖的含量,而且生成的葡萄糖酸與鈣離子結(jié)合生成的是一種理 想的補(bǔ)鈣制劑。因而,GCDH已成為制備高含量低聚果糖的理想用酶。 測定原理: GCDH催化D-葡萄糖和NAD生成D-葡萄糖酸和NADH,在340nm下測定NADH上升速率,即可反映GCDH活性。 需自備的儀器和用品: 紫外分光光度計(jì)、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本: 取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。 【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
| ② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本: 先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次); 12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。 【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10 4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。 |
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基(TSA)顆粒 Tryptose Soya Agar 300ml/袋*10
10次 3'-RACE試劑盒 3'-RACE Kit -20℃保存
100mL MOPSO Buffer,0.2M,pH6.5 MOPSO Buffer,0.2M,pH6.5 常溫保存
100g Poly(vinyl Alchohol) 常溫保存
2 ug pMIR-REPORT pMIR-REPORT 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
多價(jià)蛋白胨 Polypeptone 250g
1瓶 SK-NEP-1細(xì)胞株 SK-NEP-1 低溫運(yùn)輸和保存
高鹽瓊脂 Mannitol Salt Agar 250g
5g 2,5- 二苯基惡唑 2,5-Diphenyloxazole(PPO) 室溫保存
50T PCR檢測試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
100mL 酪蛋白溶液 Casein Blocking Solution -20℃保存
葡萄糖脫氫酶(GCDH)測試盒紫外分光光度法Neurogenin 2/NGN2 神經(jīng)元素2抗體 規(guī)格: 0.1mlCTAGE4 皮膚T細(xì)胞相關(guān)抗原4抗體 規(guī)格: 0.2ml
FIS1/TTC11 線粒體裂變1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlCD11b/Integrin αM/Integrin Alpha M 整合素αM/巨噬細(xì)胞表面分子抗體 規(guī)格: 0.1ml
T7 tag T7 tag標(biāo)簽抗體 規(guī)格: 0.1mlCIP2A/p90 Autoantigen 蛋酸PP2A抑制蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
CXXC5 二硫鍵氧化還原鋅指蛋白5抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-SRC-3 (Thr24) 磷酸化類固醇受體輔助活化因子-3 規(guī)格: 0.1ml
P14ARF/CDKN2A 抑基因p16抗體 0.1mlox-LDL 氧化脂蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
P450 1A2/CYP1A2 細(xì)胞色素P450 1A2抗體 規(guī)格: 0.2mlAQP0/MIP26 水通道蛋白0抗體 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc 規(guī)格: 0.5mlPAR3 蛋白激活受體3抗體 規(guī)格: 0.2ml
Musashi 1/Msi1 神經(jīng)干細(xì)胞RNA結(jié)合蛋白Musashi1抗體 規(guī)格: 0.2mlAngiopoietin 2/ANG2 管生成素2抗體 規(guī)格: 0.1ml
LC3 α/MAP1A/MAP LC3 Alpha/Beta 自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗體 規(guī)格: 0.1mlCD137/TNFRSF9 瘤壞死因子受體超家族成員9抗體 規(guī)格: 0.1ml
CD64/IGFR1 免疫球蛋白G Fc段受體I 規(guī)格: 0.1mlLRRC15 富含亮重復(fù)蛋白15抗體 規(guī)格: 0.2ml
M2-PK/PKM2 丙酮酸激-M2抗體 規(guī)格: 0.1mlRabbit Anti-horse IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的兔抗馬IgG 規(guī)格: 0.1ml
CNO/Cappuccino Cappuccino蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlILDR1 免疫球蛋白樣結(jié)構(gòu)域受體1抗體 規(guī)格: 0.2ml
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