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簡要描述:葡萄糖脫氫酶(GCDH)測試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:葡萄糖 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:20支 麥芽糖 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:20支 無鹽胰胨水 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:20支 7%NaCl胰胨水 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:20支
詳細介紹
實驗結(jié)果判斷我有妙招:
1、定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:
① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。
本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
葡萄糖脫氫酶(GCDH)測試盒微量法 | 100管/96樣 | 微量法 | BK-01S6765 |
商品介紹:
測定意義: GCDH(EC 1.1.1.47)催化D-葡萄糖和NAD(P)生成D-葡萄糖酸和NAD(P)H,大量存在于高等動物的肝臟和弱氧化醋桿菌中。在低聚果糖生產(chǎn)中使用GCDH,不僅能去除低聚果糖中的葡萄糖提高低聚果糖的含量,而且生成的葡萄糖酸與鈣離子結(jié)合生成的是一種理 想的補鈣制劑。因而,GCDH已成為制備高含量低聚果糖的理想用酶。 測定原理: GCDH催化D-葡萄糖和NAD生成D-葡萄糖酸和NADH,在340nm下測定NADH上升速率,即可反映GCDH活性。 需自備的儀器和用品: 紫外分光光度計、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
試劑組成和配制:
提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
操作步驟:
1. 樣品的準(zhǔn)備:
a. 細胞樣品的準(zhǔn)備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測定。
2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。
b. 反應(yīng)啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應(yīng)啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
MS培養(yǎng)基 MS Medium 250g
1瓶 SW1990細胞株 SW1990 低溫運輸和保存
XLD培養(yǎng)基 Xylose Lysine Desoxycholate Medium 250g
5g 赤蘚紅 B 二鈉鹽 Erythrosin B Disodium Salt 室溫干燥避光保存
50T 肺炎鏈球菌PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存
1瓶 LOVO細胞株 LOVO 低溫運輸和保存
2 ug SD1211- 3 SD1211- 3 低溫運輸,-20℃保存
50mL 內(nèi)毒素清除專用親和介質(zhì) Endotoxin Removal Resin 4℃保存
2 ug pET-42b(+) pET-42b(+) 低溫運輸,-20℃保存
馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA)(新藥典) 250g
1瓶 AsPC-1細胞株 AsPC-1 低溫運輸和保存
葡萄糖脫氫酶(GCDH)測試盒微量法Integrin Alpha V + Beta1 整合素αVβ1抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-JunD(Ser255) 磷酸化活化蛋白激D抗體 規(guī)格: 0.1ml
Mouse Anti-rat IgG/AP 堿性磷酸(AP)標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml
EpCAM/CD326 上皮細胞粘附分子抗體 規(guī)格: 0.1ml
Phospho-Cas (Tyr165) 磷酸化細胞凋亡敏性基因 規(guī)格: 0.1ml
NDUFA10 NADH氧化還原輔10抗體 規(guī)格: 0.2ml
CENPA 著絲粒蛋白A 規(guī)格: 0.1mlFactor H 補體因子H抗體 規(guī)格: 0.2ml
VANGL2 神經(jīng)管畸形相關(guān)蛋白VANGL2抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-GRM2/GLUR2(Tyr876) 磷酸化促代謝型谷受體2抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-CTNNBIP1 (Ser36) 磷酸化β鏈接素相互作用蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1mlCKMT2 肌酸磷酸激2抗體 規(guī)格: 0.2ml
GCMA/GCM1 絨毛膜特異性轉(zhuǎn)錄因子GCMa抗體 規(guī)格: 0.2mlConnexin-32 間隙連接蛋白32抗體 規(guī)格: 0.1ml
APOA4 載脂蛋白A4抗體 規(guī)格: 0.2mlRRAGA RAS相關(guān)GTP結(jié)合蛋白A抗體 規(guī)格: 0.2ml
SLAMF9/CD2F-10 CD2F-10抗體 規(guī)格: 0.2mlBAALC 腦和急性白胞漿蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
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