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土壤酸性轉(zhuǎn)化酶(SAI)測試盒微量法

簡要描述:土壤酸性轉(zhuǎn)化酶(SAI)測試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:改良馬丁液體 進(jìn)口、國產(chǎn)Martin Broth ,Modified用于菌苗制造及生物制品霉菌無菌檢驗(yàn)250改良馬丁瓊脂 進(jìn)口、國產(chǎn)Martin Agar Medium ,Modified用于生物制品霉菌無菌檢驗(yàn)250霉菌進(jìn)口、國產(chǎn)Mould Medium用于生物制品霉菌無菌試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))250營養(yǎng)瓊脂(NA) 進(jìn)口、國產(chǎn)Nutr

  • 產(chǎn)品型號(hào):
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時(shí)間:2023-12-25
  • 訪  問  量:416

詳細(xì)介紹

實(shí)驗(yàn)方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點(diǎn):

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

產(chǎn)品名稱:土壤酸性轉(zhuǎn)化酶(SAI)測試盒微量法

產(chǎn)品規(guī)格:100管/48樣

檢測方法:微量法

產(chǎn)品貨號(hào):BK-01S6882

產(chǎn)品分類:土壤系列
商品介紹:

測定意義:

S-AIpH 4.5~5.0(酸性)條件下催化蔗糖不可逆地分解為果糖和葡萄糖,是土壤微生物蔗糖代謝關(guān)鍵酶之一。

測定原理:

S-AI催化蔗糖降解產(chǎn)生還原糖,進(jìn)一步與3,5-二硝基水楊酸反應(yīng),生成棕紅色氨基化合物,在510nm有特征光吸收,在一定范圍內(nèi)510nm光吸收增加速率與AI活性成正比。

自備用品:

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

所需的儀器和用品:

可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)

樣本和試劑浪費(fèi)!

1、樣本制備

組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進(jìn)行提取

 

細(xì)菌/細(xì)胞樣本:

先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10

4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進(jìn)行提取。 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

QQ截圖20220307153537.png 

注意事項(xiàng):

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。

2、對(duì)照管只需要做一管。

3、若對(duì)照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?

對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間30min可以延長到40min)。對(duì)照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

若出現(xiàn)測定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通??梢允箿y定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

1瓶 MCF 7B細(xì)胞株 MCF 7B 低溫運(yùn)輸和保存

TGY瓊脂  250g

25mg 蛋白 K Proteinase K  4℃保存

1000mL TBS-EDTA Solution,10X  TBS-EDTA Solution,10X  常溫保存

10mL 鎳柱介質(zhì) Ni-Agarose Resin  4℃保存

2 ug pBAD His A pBAD His A 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

100mL DEPC水 DEPC-Treated Water 常溫

500mL Phosphate Buffer,0.2M, pH7.4   Phosphate Buffer,0.2M, pH7.4   常溫保存

LS Lactose Sulfite Medium(LS) 250g

1g 5- 吡哆醛,一水 Pyridoxal 5-Phosphate, Monohydrate -20℃保存

50T 嗜肺軍團(tuán)菌16S rRNA基因(160bp)常規(guī)PCR檢測試劑盒  低溫運(yùn)輸,-20℃保存

土壤酸性轉(zhuǎn)化酶(SAI)測試盒微量法Phospho-PPAR Gamma (ser112)  磷酸化過氧化活化增生受體γ抗體 規(guī)格: 0.1ml

OSTM1  骨硬化相關(guān)跨膜蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml

LI-cadherin  肝腸鈣粘連蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

phospho-IL-7Ra(Tyr449)  磷酸化白細(xì)胞介素-7受體a抗體 規(guī)格: 0.1ml

Phospho-eNOS(Thr495)  磷酸化氮合成3抗體(內(nèi)皮型) 規(guī)格: 0.1ml

FRA2/FOSL2  FRA2/FOSL2抗體 規(guī)格: 0.1ml

phospho-c-Jun(Thr91+Thr93)  磷酸化原基因c-Jun抗體 0.1ml

TSPAN13/NET-6  四分子交聯(lián)體13抗體(四旋蛋白) 規(guī)格: 0.2ml

SLC24A5  可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白SLC24A5抗體 規(guī)格: 0.1ml

MSH6  錯(cuò)配修復(fù)蛋白6抗體 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-mouse IgM/AP  堿性磷酸(AP)標(biāo)記的兔抗小鼠IgM 規(guī)格: 0.1ml

UGT2B4  尿苷二磷酸葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移2B4抗體 規(guī)格: 0.2ml 

 


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