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簡要描述:土壤羥胺還原酶(HR)測試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:YPD瓊脂 進口、國產(chǎn)Yeast Peptone Dextrose Agar用于測定酵母菌總數(shù)(GB標(biāo)準(zhǔn))250抗生素檢定1號(高PH) 進口、國產(chǎn)Antibiotic Agar 用于鏈,卡那,慶大,紅等效價測定250抗生素檢定1號(低PH) 進口、國產(chǎn)Antibiotic Agar 用于磺芐青效價測定250抗生素檢定2號(高PH) 進
詳細(xì)介紹
實驗方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱:土壤羥胺還原酶(HR)測試盒微量法
產(chǎn)品規(guī)格:100管/48樣
檢測方法:微量法
產(chǎn)品貨號:BK-01S6870
產(chǎn)品分類:土壤系列
商品介紹:
測定意義: 土壤羥胺還原酶能將土壤中氮代謝過程中形成的中間產(chǎn)物羥胺還原為氨,土壤中的還原態(tài)化合物可作為氫的供體,其強弱影響到土壤氮代謝過程中氮素的氨揮發(fā)損失,間接影響氮肥的利用效率。 測定原理 硫酸鐵銨中的Fe3+可將羥胺氧化為氮氣,自身被還原為Fe2+,Fe2+在弱酸條件下與鄰菲羅琳形成橙紅色配合物,在510nm處有吸收峰,羥胺還原酶作用于羥胺,使配合物形成量減少,510nm處吸光值的減少可反映羥胺還原酶的活性。 自備實驗用品及儀器 天平、常溫離心機、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、震蕩儀、氮吹儀。 |
所需的儀器和用品:
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗
樣本和試劑浪費!
1、樣本制備
① 組織樣本: 取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。 【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進行提取
| ② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本: 先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次); 12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。 【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10 4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。 |
注意事項:
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?
對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時間不夠,可以延長反應(yīng)時間(反應(yīng)時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通常可以使測定正常。計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
2 ug pLVPT-GDNF-rtTR-KRAB-2SM2 pLVPT-GDNF-rtTR-KRAB-2SM2 低溫運輸,-20℃保存
葡萄糖天門冬素 Glucose Asparagine Medium 250g
1瓶 NCI-H520細(xì)胞株 NCI-H520 低溫運輸和保存
雙料月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯(LST) 250g
25g 鈉 Barbital Sodium 室溫保存
50T 阪崎腸桿菌rpsU-dnaG 基因間序列(78bp)常規(guī)PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存
100mL Bradford法蛋白定量試劑盒 Bradford Protein Assay Kit 常溫保存,BSA標(biāo)準(zhǔn)需要-20℃保存
2 ug pTRE-Tight-BI pTRE-Tight-BI 低溫運輸,-20℃保存
200次 柱式血液DNAout Column Blood DNAOUT 常溫
2 ug pECFP- ER pECFP- ER 低溫運輸,-20℃保存
CIN-1瓊脂平板9cm Cepulodin Irgasan Novobiocin Agar 10個/包
土壤羥胺還原酶(HR)測試盒微量法OGFOD1 末端多聚苷酸1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
KCND1/Kv4.1 電壓門控鉀通道Kv4.1抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-mouse IgG/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗小鼠IgG 規(guī)格: 0.5ml
AT1R/AGTR1 管緊張素Ⅱ-1型受體抗體 規(guī)格: 0.1ml
CCNYL1 周期素樣Y1抗體 規(guī)格: 0.2ml
Quiescin Q6/QSOX1 巰基氧化1抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-mouse IgG/HRP 辣根過氧化物標(biāo)記的兔抗小鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml
DIRC2 干擾細(xì)胞蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml
Thymidylate synthase/TS 胸苷酸合成抗體 規(guī)格: 0.1ml
IHH HHG2抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-DDX58 (Ser8) 磷酸化DDX58抗體 規(guī)格: 0.1ml
Azurocidin/Cationic antimicrobial protein 37 肝素結(jié)合蛋白/陽離子抗菌蛋白37/天青殺素抗體 規(guī)格: 0.2ml
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