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當(dāng)前位置:首頁   >  產(chǎn)品中心  >  細(xì)胞  >  細(xì)胞系  >  5×106cells/瓶4T1(小鼠乳腺癌細(xì)胞)

4T1(小鼠乳腺癌細(xì)胞)

簡(jiǎn)要描述:CIN-1瓊脂平板(9cm) CIN-1 Agar 10個(gè)/包

含青霉素酶TSA培養(yǎng)基平板(7cm) Tryptose Soya Agar 10個(gè)/包

含青霉素酶接觸皿培養(yǎng)基平板(5.5cm) Contact Plate Medium 10個(gè)/包

TSA培養(yǎng)基平板(9cm) TSA 10個(gè)/包

  • 產(chǎn)品型號(hào):5×106cells/瓶
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時(shí)間:2023-12-17
  • 訪  問  量:2367

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品特點(diǎn):
1、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。
2、 可以處理各種細(xì)菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時(shí)間縮短至30分鐘-1小時(shí)。
4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測(cè)蛋白濃度時(shí),背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。

在實(shí)驗(yàn)過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。

產(chǎn)品名稱

 4T1(小鼠乳腺癌細(xì)胞)

規(guī)格

5×106cells/瓶

貨號(hào)

 BK-X87416


培養(yǎng):
1.取出小鼠后瀝干酒精,放入超凈臺(tái)內(nèi),固定在泡沫板上。
2.用鑷子提起皮膚,用解剖剪剪開皮膚一個(gè)橫切口,將皮膚向上撕開,然后剪開肌肉等,暴露出腹腔,在左側(cè)找到脾臟,用彎頭眼科鑷取出脾臟,置于無菌培養(yǎng)皿中。
3.用生理鹽水將取出的脾臟清洗多次,并剔除多余無用的組織。
4.將篩網(wǎng)置于平皿中,脾臟置于篩網(wǎng)上,用彎頭鑷鑷住,輕輕在篩網(wǎng)上進(jìn)行碾磨,同時(shí)不停滴加不含血清的培養(yǎng)液沖洗。
5.將碾磨好的細(xì)胞懸液吸入至離心管中,離心(1000rpm,5min),吸去上清(去除血液等)。
6.加入10ml培養(yǎng)液,吹打混勻,取樣計(jì)數(shù)。
7.將稀釋好的細(xì)胞懸液分裝于培養(yǎng)瓶中,輕輕搖晃混勻,在培養(yǎng)瓶上。
實(shí)驗(yàn)事項(xiàng):
1. 試劑準(zhǔn)備:所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫,使用后請(qǐng)立即按照說明書要求保存試劑。  實(shí)驗(yàn)操作中請(qǐng)使用一次性的吸頭,避免交叉污染。
2.   加樣:加樣或加試劑時(shí),請(qǐng)注意在吸取標(biāo)本 / 標(biāo)準(zhǔn)品,酶結(jié)合物或底物時(shí),前一個(gè)孔與后一個(gè)孔加樣之間的時(shí)間間隔如果太大,將會(huì)導(dǎo)致不同的“預(yù)孵育"時(shí)間,從而明顯地影響到測(cè)量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。一次加樣時(shí)間(包括標(biāo)準(zhǔn)品及所有樣品)好控制在10分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用多道移液器加樣。
3.   孵育:為防止樣品蒸發(fā),試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,以避免液體蒸發(fā);洗板后應(yīng)盡快進(jìn)行下步操作,任何時(shí)侯都應(yīng)避免酶標(biāo)板處于干燥狀態(tài);同時(shí)應(yīng)嚴(yán)格遵守給定的孵育時(shí)間和溫度。
4.   洗滌:洗滌過程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水,同時(shí)要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。
5.  試劑配制:Detection A及Detection B在使用前請(qǐng)手甩幾下或少時(shí)離心處理,以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液A工作液、檢測(cè)溶液B工作液請(qǐng)依據(jù)所需的量配置使用,并使用相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。請(qǐng)確配置標(biāo)準(zhǔn)品及工作液,盡量不要微量配置(如吸取檢測(cè)溶液A時(shí),一次不要小于10μl),以避免由于不準(zhǔn)確稀釋而造成的濃度誤差;請(qǐng)勿重復(fù)使用已稀釋過的標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液A工作液或檢測(cè)溶液B工作液。
6.  反應(yīng)時(shí)間的控制:加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如,每隔10分鐘),如顏色較深,請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng),避免反應(yīng)過強(qiáng)從而影響酶標(biāo)儀光密度讀數(shù)。
7.  底物:底物請(qǐng)避光保存,在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。
    建議檢測(cè)樣品時(shí)均設(shè)雙孔測(cè)定,以保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
    如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高,請(qǐng)先稀釋后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以稀釋倍數(shù)。

牛津瓊脂(OXA)平板(9cm) Oxford Agar Base 10個(gè)/包

PALCAM瓊脂平板(9cm) PALCAM Agar 10個(gè)/包

MRS瓊脂平板(9cm) MRS Agar 10個(gè)/包

TCBS瓊脂平板(9cm) Thiosulfate Citrate Bile Salts Sucrose Agar 10個(gè)/包

慶大霉素瓊脂平板(9cm) Gentamycin Agar 10個(gè)/包

BCYE瓊脂平板(9cm) BCYE Agar Base 10個(gè)/包

GVPC瓊脂平板(9cm) GVPC Agar Base 10個(gè)/包

我妻氏血瓊脂平板(9cm) Wagstsuma Blood Agar Base 10個(gè)/包

NA平板(加青霉素酶)(9cm) Nutrient Agar 10個(gè)/包

CIN-1瓊脂平板(9cm) CIN-1 Agar 10個(gè)/包

含青霉素酶TSA培養(yǎng)基平板(7cm) Tryptose Soya Agar 10個(gè)/包

含青霉素酶接觸皿培養(yǎng)基平板(5.5cm) Contact Plate Medium 10個(gè)/包

TSA培養(yǎng)基平板(9cm) TSA 10個(gè)/包

RODAC培養(yǎng)皿(TSA)(55mm) RODAC 10個(gè)/包

4T1(小鼠乳腺癌細(xì)胞)腫瘤壞死因子配體超家族成員9(TNFSF9)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱 :TNFSF9 ELISA Kit,英文縮寫:TNFSF9,

脂肪酶J(LIPJ)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱 :LIPJ ELISA Kit,英文縮寫:LIPJ,

粘蛋白7(MUC7)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱 :MUC7 ELISA Kit,英文縮寫:MUC7,

運(yùn)動(dòng)因子相關(guān)蛋白1(MRP1)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱 :MRP1 ELISA Kit,英文縮寫:MRP1,

原鈣黏素12(PCDH12)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱 :PCDH12 ELISA Kit,英文縮寫:PCDH12,

乙醇脫氫酶4(ADH4)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱 :ADH4 ELISA Kit,英文縮寫:ADH4,

巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶7(FUT7)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱 :FUT7 ELISA Kit,英文縮寫:FUT7,

血小板親和蛋白4(PKP4)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱 :PKP4 ELISA Kit,英文縮寫:PKP4,

血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2(VEGFR2)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱 :VEGFR2 ELISA Kit,英文縮寫:VEGFR2,

形成素2(FMN2)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱 :FMN2 ELISA Kit,英文縮寫:FMN2,

小腦肽2(CBLN2)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱 :CBLN2 ELISA Kit,英文縮寫:CBLN2,

?;视图っ?/font>(AGK)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱 :AGK ELISA Kit,英文縮寫:AGK,

細(xì)胞因子受體樣因子1(CRLF1)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱 :CRLF1 ELISA Kit,英文縮寫:CRLF1,

無脈絡(luò)膜蛋白(CHM)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱 :CHM ELISA Kit,英文縮寫:CHM,

操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長(zhǎng)至60%~70%融合時(shí),用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ,計(jì)算貼壁率。 
1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線。

 

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