SETD7試劑盒檢測程序：

1. 加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品（已激活） 100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

2. 洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向?yàn)V紙上印干。

3. 每孔中加入第一抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。

4. 洗板：同前。

5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。

6. 洗板：同前。

7. 每孔加入底物工作液100ul ，置 37 ℃ 暗處反應(yīng)15 分鐘。

8. 每孔加入100ul 終止液混勻。

9. 30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在 45 0 nm 處測 吸光值。

結(jié)果計(jì)算與判斷

1. 所有 OD 值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。

2. 以標(biāo)準(zhǔn)品20 00 、100 0 、500 、 250 、 125 、 62.5 、 31.2 、 0 pg /ml 為橫坐標(biāo)， OD 值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上作圖，畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。

3. 根據(jù)樣品 OD 值在該曲線圖上查出相應(yīng) E2F1 含量 ，再乘上稀釋倍數(shù)即可 。

試劑盒性能

1. 靈敏度 ： 最小的E2F1 檢測濃度小于 15 pg/ml。

2. 特異性： 可同時(shí)檢測重組或天然的人 E2F1 。 不與 人其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。

3. 重復(fù)性：板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于8.9％。

小鼠肝癌細(xì)胞；Hepa 1-6 [Hepa1-6]

小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞；P815

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞；3T6-Swiss albino

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞；C3H 10T1/2 2A6

小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤細(xì)胞；DCS

小鼠淋巴瘤細(xì)胞；EL4

小鼠前胃癌細(xì)胞；MFC

小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞；RAW 264.7 [RAW264.7

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞；3T3-L1

小鼠乳腺癌細(xì)胞；CCC-Ca761-03

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞；BALB/C 3T3

小鼠淋巴細(xì)胞白血??；L1210

小鼠肺腺癌細(xì)胞系；LA795

C3H/An小鼠結(jié)締組織細(xì)胞（L929-TK-）；LTK-

小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞；SH2

小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞；SH3

倉鼠/小鼠雜交瘤細(xì)胞；145-2C11

小鼠黑色素瘤細(xì)胞；B16

小鼠T淋巴細(xì)胞；Cl.Ly1+2-/9

小鼠單核巨噬細(xì)胞；J774A.1

小鼠腎集合管細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化)；M-1

綠色熒光蛋白標(biāo)記小鼠前胃癌細(xì)胞；MFC-GFP

小鼠腎足細(xì)胞；Mouse podocyte

小鼠淋巴瘤細(xì)胞；P388D1(IL-1)

小鼠子宮頸癌細(xì)胞；U14

綠色熒光蛋白標(biāo)記小鼠子宮頸癌細(xì)胞；U14-GFP

小鼠漿細(xì)胞瘤；MPC-11

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞；PA317